迷糊的人间清醒
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HUVECs细胞需要好一点的培养基来养
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A549是癌细胞,比较好养。人脐内皮细胞比较难养。
高山云初
没有肿瘤细胞A549好养活,必须在培养条件下放置,细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。培养基:内皮细胞培养基础培养基+5% FBS+1%内皮细胞培养添加剂+1% P/S
推荐传代比例:1:3-1:4,每2-3天换液一次
培养条件:气相:95%空气+5%CO,温度:37℃
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人脐静脉内皮细胞没有肿瘤细胞A549好养。容易被污染,培养时应严格无菌操作。
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内皮细胞肯定不如肿瘤细胞好养的,如果注意培养过程的无菌,注意双抗的话,污染和传代还是可以的。
小小翻车鱼
HUVECs是一种常见的正常血管内皮细胞,常用于研究内皮细胞生物学、血管生成、炎症反应等方面。与肿瘤细胞(如A549)相比,HUVECs的生长特性和传代能力有所不同。
以下是关于HUVECs培养的一些建议和注意事项:
1. 培养基:HUVECs通常使用内皮细胞专用培养基,如Endothelial Cell Basal Medium (EBM),也可使用DMEM或M199等基础培养基添加内皮细胞生长添加剂(如EGM-2MV、EGM-2)。而肿瘤细胞通常使用含血清的培养基,如DMEM或RPMI。
2. 生长特性:HUVECs生长速度相对较慢,对血清和生长因子的需求较高。肿瘤细胞生长速度较快,对血清和生长因子的需求相对较低。
3. 污染:HUVECs对培养条件要求较高,较容易受到其他细胞污染。肿瘤细胞对污染的抵抗能力相对较强。为防止污染,应严格遵循无菌操作规程,定期检测培养物的生长特性和形态。
4. 传代:HUVECs传代能力相对较弱,传代过程中要注意避免过度操作和机械损伤。肿瘤细胞传代能力相对较强。
5. 建议和注意事项:
a. 在培养HUVECs时,应注意调节培养基中的氧气浓度,保持2-5%的氧气含量,以模拟体内生理环境。
b. 保持良好的细胞生长环境,注意温度(37°C)和湿度(95%)的控制。
c. 定期检测HUVECs的形态、生长速度和生长状态,及时发现和处理问题。
d. 传代时,尽量避免使用胰酶处理HUVECs,因为胰酶可能会损伤内皮细胞。可以使用胶原蛋白酶进行温和的消化。
e. 传代过程中,尽量减少HUVECs的分离次数,以降低细胞损伤。
周末也要努力呀
正常内皮细胞没有肿瘤细胞好养,但是任何细胞都要注意无菌操作最重要的