请问胰酶的加量和消化程度怎么判断呢？ 消化多久呢？加全培中和的话比例是多少比较好？

胰酶加量略盖过细胞即可，一般消化时间在1－3分钟比较合适。

肉眼观察——轻轻摇晃，使胰酶均匀润过培养瓶底部，然后用手拍打培养瓶底部(力度均匀，或者放在CO2培养箱中孵育1min)，肉眼观察有流沙状即可

不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动就可以了，就应该停止消化。

一般6cm皿或者25mm培养瓶用1ml胰酶足以覆盖细胞，消化时间要根据细胞的特性，一般细胞消化2-3分钟就可以，有些细胞像hepg2细胞可能需要10min左右

以下是关于胰酶加量和消化程度的判断以及加入全培养基的比例的建议：

1. 胰酶加量和消化程度的判断：胰酶的加量和消化程度可以根据细胞类型、细胞的粘附性和培养器具的特性等因素进行判断。一般来说，细胞在胰酶消化下可以呈现分散、圆润的状态。以下是一些指导原则：

- 加量：胰酶的加量要根据细胞的数量和培养器具的大小来决定。通常建议每毫升培养基中加入适量的胰酶，以保证细胞可以充分分散。

- 消化程度：消化程度的判断要根据细胞的可见状态和显微镜下的观察来确定。一般情况下，胰酶消化时间较短（例如5-15分钟）可以实现部分细胞的分散，而较长时间（例如30分钟至1小时）的消化可以实现更彻底的细胞分散。

2. 加入全培养基的比例：加入全培养基是为了停止胰酶的消化作用，保护细胞并提供适当的营养和生长条件。比例的选择要根据具体情况来确定，一般建议：

- 对于细胞密度较高的情况，可以将等体积的全培养基加入到胰酶中，以稀释胰酶的浓度并停止消化作用。

- 对于细胞密度较低的情况，可以加入稍多于等体积的全培养基，以确保细胞的充分稀释和营养供应。

请注意，具体的加量和消化时间以及加入全培养基的比例应根据您所使用的细胞类型、实验目的以及实验室经验进行优化和调整。建议在实验前进行小规模试验，并根据试验结果进行进一步的优化。