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悬浮细胞转染时铺板怎么铺均匀
Eason老歌迷
注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。细胞悬液加完后,将细胞培养板抬高,对着灯光,从底部往上看,看细胞有没有抱团。然后从底部敲击,使之分散。如果实验室有平板振荡器的话,我建议用这个仪器稍振荡一下,效果不错,就是振幅小,频率高的那种。
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悬浮细胞用T25瓶养,如何分布均匀
whilt-shirt
先将细胞收集好后离心,然后用培养基混匀,种瓶后画8字
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用AkTA仪器纯化带his标签的蛋白,到洗脱这步仪器起峰了,但是风不好看,这是因为什么
Eason老歌迷
确实是有峰,但是这个封有点奇怪。可能是你纯化没做好,建议你优化一下纯化步骤。
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【求助】pbmc细胞形态
Eason老歌迷
小圆形的是淋巴细胞。稍大一点的是单核。形状不规则的细胞有点像巨噬。第二张图里成簇的是扩增的单核。
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麻烦大家帮我看看,这个细胞有没有污染
Gx41
看起来不像污染。可以关注一下培养基颜色及清澈度,黄色混浊考虑污染可能
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问
细胞培养废液负压吸引器如何消毒
whilt-shirt
一般是用八四消毒液清洗后照紫外,清洗频率是满了就洗
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做的甲醇水溶液组织提取物,想用冻干机冻干成粉末,但液体被真空吸走了,该怎么办?
bamboopiggy
先用氮气将液体中的甲醇充分吹走,剩余的液体再冻干
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怎样避免细胞培养过程中的污染问题
ganglinliya
减少实验过程中说话交流,按照灭菌流程进行器具处理
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问
CCK8很有意思的问题
ganglinliya
换个试剂盒试试,或者选择其他的检测方法
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问
请问大家做免疫荧光是怎么调焦距的啊 以DAPI的为准吗(LSM800)
bocardio5927
习惯目镜下DAPI先找到细胞(核),低倍镜下找到阳性表达区域,固定标本位置,放大倍数dapi定位,转到目标荧光通道,微调,merge后图片没有重影为宜,动作要快。
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细胞培养瓶出现白点是什么
Eason老歌迷
看你这个像是细胞污染,可能是真菌污染,建议你下次细胞培养一定要注意无菌操作,然后培养基要过滤。
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细胞污染
Eason老歌迷
你这个像是细胞传代时候细胞老化死亡的碎片,也可能是细胞污染,你可以用pbs洗洗看。
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代谢组问题咨询,谢谢各位老师
Eason老歌迷
同学你好,建议你用1/2ic50浓度处理细胞送代谢组。要看三氧化二砷最小的中毒血药浓度,你可以做一个细胞生长曲线图,或者是做一个MTC。
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问
信号通路相关(细胞)
Gx41
根据相关文献确定TGF处理细胞最佳时间,处理相应时间后提取蛋白检测你的目标蛋白。
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肿瘤干细胞培养困惑,求高手解答
麻黄连翘赤小豆
建议不要太过频繁的传代和清洗,本身胰酶对细胞是有损伤的,贴壁细胞没用了,已经老化,把剩下的悬浮细胞好好培养
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肿瘤干细胞培养出现大量细胞贴壁,培养周期效率差
麻黄连翘赤小豆
肿瘤细胞一般我们都是选取悬浮细胞,贴壁的不要因为都老化了,没办法转换过来
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人外周血流式,结果treg的细胞内foxp3上机测不出来,是哪里出了问题?
Eason老歌迷
破核的时间我觉得是最重要的原因,破核时间不充分会造成后续步骤都染不上。其次是Foxp3染色的浓度与染色时间。
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细胞培养
ganglinliya
都可以,用培养瓶不容易污染,感觉消化传代更顺手
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氧糖剥夺求助
Eason老歌迷
你可以先参考这篇文献,“离体神经干细胞氧糖剥夺模型的建立及改变培养条件对神经干细胞的影响分析”。还有这一篇“ PC12 细胞中持续性氧糖剥夺模型的建立”,讲的都很详细。
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基因电路 求助
Eason老歌迷
这些箭头是表示如何连接顺序,还有复制转录。这都是在质粒上构建,然后再转到细菌里,你可以看到最后都是到右下角的细菌里
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