丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

肿瘤干细胞培养困惑,求高手解答

user-title

showme5267

我做的是甲状腺未分化癌干细胞的培养,用的细胞系(8505C,CAL62),用的是无血清培养法,DMEM/F12+B27+EGF+bFGF。最近培养发现一个比较难受的问题,刚开始培养悬浮细胞很多,经过2-3次传代或换液,细胞大面积贴壁,用胰酶消化后重新悬浮,仍有大量细胞贴壁,我每次已经多次用PBS洗细胞,换过好几种无TC处理的培养瓶,但还是出现这种情况,很困惑,请高手帮忙解答,谢谢

wx-share
分享

3 个回答

user-title

麻黄连翘赤小豆

有帮助

建议不要太过频繁的传代和清洗,本身胰酶对细胞是有损伤的,贴壁细胞没用了,已经老化,把剩下的悬浮细胞好好培养

user-title

showme5267user-title

我现在很少用酶消化了,直接离心后换液,但是还是贴壁啊

user-title

Eason老歌迷

有帮助

其实你这里认识有点误区,就是悬浮细胞一定不会贴壁,事实上没有完全不贴壁的细胞,据我所知,细胞贴壁依赖的是细胞表面的桥粒结构,这种结构其实各种类型的细胞上都有,只是实质组织来源的细胞更加密集而已,而其他本来就是单独存在的细胞比如淋巴细胞上这种结构很少而已。但是少并不意味着就不能贴壁。我养巨噬细胞的时候也是,一半贴壁一般悬浮,而且贴壁的细胞相当牢固,必须用胰酶消化才行。

user-title

whilt-shirt

有帮助

这种情况有可能是细胞已经分化了

user-title

showme5267user-title

那如何避免这种分化现象的出现呢

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序