传代培养细胞死亡的问题？

刚复苏的细胞一开始长得很好一传代就死，可能有以下四种原因：

1，培养液有毒。

2，PH有异常。

3，细胞对添加剂较敏感。

4，培养环境的影响。

5，细胞染菌。

如果是冻存的问题，你在复苏后立马就会出问题，可能一代都都穿不了的。所以看这个情况，应该不是你冻存细胞的问题，个人感觉有可能是你培养液或者是血清的问题，我不知道你复苏后在继续传代的时候用的培养液和你当初冻存细胞前的是否一样，如果不一样的话， 建议你换新的培养液试试。

培养细胞死亡可能原因：

●培养箱内无CO2；

●培养箱内温度波动太大；

●细胞冻存或复苏过程中损伤；

●培养液渗透压不正确；

●培养液中有毒代谢产物堆积

是不是胰酶消化时间长了？或者是复苏的细胞本身就没有张。