人外周血流式，结果treg的细胞内foxp3上机测不出来，是哪里出了问题?

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想吃小碗饭

2022-08-17

做的th17和treg细胞，按照edta抗凝外周血提取pbmc-染胞外-培育-破膜-固定-染胞内-上机的流程来的，th17两个标记看起来挺正常，但是treg的foxp3指标是一点都没有……做了好久了测不出来，有没有大佬帮忙看看图

cd4-fitc，cd25-apc，foxp3-percp cy5.5

2 个回答

dxy_u816w4de

2024-01-21

有帮助

楼主还能看到嘛，请问最后怎么解决的啊

Eason老歌迷

2022-08-18

有帮助

破核的时间我觉得是最重要的原因，破核时间不充分会造成后续步骤都染不上。其次是Foxp3染色的浓度与染色时间。

想吃小碗饭

2022-08-20

您好！我的实验用的ebio的破膜套装3瓶子，应该叫permeabilization x10的，用pbs稀释10倍，加到样本中，洗涤两次，然后最后100ul破膜液重悬，同时加入foxp3和il-17a抗体染色，一般这个步骤我会放1-2小时，结果il-17a能染上，foxp3染不上。如果说破膜补充分的话，为什么会有il-17呢