请问大家做免疫荧光是怎么调焦距的啊以DAPI的为准吗（LSM800）

bocardio5927

2022-08-19

有帮助

习惯目镜下DAPI先找到细胞（核），低倍镜下找到阳性表达区域，固定标本位置，放大倍数dapi定位，转到目标荧光通道，微调，merge后图片没有重影为宜，动作要快。

keyijfd

2022-08-22

请问一下怎么判断merge有没有重影呀～

bamboopiggy

2022-08-18

有帮助

先找到dapi，然后再微调。镜下和屏幕上看到的还是有点差异的

balalaLy

2022-08-18

有帮助

一般都是看dapi找到细胞调焦距，因为dapi比较明显且稳定，其它荧光照射久了会萃灭，影响定量分析

whilt-shirt

2022-08-18

有帮助

每个波长的焦距不太一样，先调好DAPI，其他波长然后根据DAPI稍微调整

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