跑电泳时，结果不清晰咋办

原因有很多。第一，蛋白上样量可能太少了；第二，上样蛋白太杂了，没有纯净的条带；第三，上样蛋白含盐量或其他离子量太高；第四，配置的胶浓度不合适；第五，样品蛋白经过上样处理液处理的不够充分；第六，胶脱色后浸泡过久等等，还是要结合你自己试验的过程来分析才行

1.确定胶浓度合适，尽量让条带比较直。2.转膜三明治夹心弄好。

结果不清晰可能的原因及建议：

①你所检测的样本中不表达目的蛋白，选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性，同时查阅文献。

②检测样本低表达目的蛋白，提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。

③转移不完全或过转移，可以用丽春红染膜并结合染胶(考马斯亮蓝)后确定条带是否转至膜上或转移过头；适当调整转膜的时间和电流。

④抗体不能识别测试种属的相关蛋白，购买抗体前应当认真阅读抗体说明书，确定其是否能够交叉识别测试种属的对应蛋白。

⑤一抗孵育时间不足，建议4℃结合过夜。

⑥二抗与一抗不匹配，选择针对一抗来源的种属的抗体。

⑦洗膜过度，洗膜时间不宜过长，加入的去垢剂不宜过强或过多，建议使用0.1%的弱去垢剂Tween-20。

1：点样过多，到达了膜边缘，会导致边缘效应，蛋白质会混和在一起，导致图谱不清晰，不整齐。

2：放置膜在电泳装置中时，两边缘的气泡未排干净，会导致图谱断点。