怎样根据蛋白分子量配分离胶和浓缩胶浓度？？

分离胶浓度的选择 分离胶的浓度主要依据目标蛋白的分子量来确定。

蛋白分子量越小，所需的分离胶浓度通常越高，

以便更好地分离和分辨小分子蛋白。

常见的分离胶浓度包括4%、6%、8%、10%、12%等，

不同浓度的分离胶对应不同的最适蛋白分子量范围。

4%分离胶：适用于较大分子量的蛋白质，但一般不常用。

6%分离胶：适用于中等至较大分子量的蛋白质，

如10-200 kDa。 8%分离胶：适用于较小分子量的蛋白质，

如10-100 kDa，分辨率较高。

10%分离胶：适用于更小分子量的蛋白质，

如5-80 kDa，分辨率也较高。

12%分离胶：适用于非常小的分子量蛋白质，

如2-40 kDa，分辨率最高。

分离胶浓度要根据蛋白分子量来，一般网上都有指导。浓缩胶一般4-6%，主要是为了压缩蛋白，让所有蛋白在同一个起跑线，理论上是比分离胶浓度低越多效果越好。我们专业从事生物技术服务，性价比高，结果有保障，可先实验后付款。

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根据蛋白分子量配分离胶和浓缩胶浓度的方法如下：

浓缩胶浓度的选择：浓缩胶通常用于使样品中的蛋白质在电泳开始前集中成一条薄带，以便进入分离胶。浓缩胶的浓度基本不变，可以根据目标蛋白的分子量选择适当的浓度。例如：

对于20-100 kDa的分子量，选择10%的浓缩胶。

对于30-120 kDa的分子量，选择8%的浓缩胶。

对于20 kDa以下的分子量，选择12%的浓缩胶。

对于120 kDa以上的分子量，选择6%的浓缩胶。

分离胶浓度的选择：分离胶的浓度直接影响蛋白质的分离效果。根据目标蛋白的分子量，选择合适的分离胶浓度。一般建议如下：

对于分子量较小的蛋白质（如actin以下），可以使用12%的分离胶。

对于分子量较大的蛋白质（如几百kDa），可以使用6%的分离胶。

对于一般的小蛋白，12%或10%的分离胶通常都能跑。

凝胶的制备：在制备凝胶时，需要注意以下几点：

根据所需的凝胶浓度，按照标准配方表配制分离胶和浓缩胶。

在加入过硫酸铵（APS）和四甲基乙二胺（TEMED）之前，确保其他成分已经充分混合。

在加入APS和TEMED后，立即进行灌胶操作，以避免凝胶过早凝固。

注意事项：

确保使用的试剂新鲜且无沉淀。

在操作过程中，注意安全，特别是处理具有神经毒性的TEMED时，应在通风良好的环境中进行，并佩戴适当的个人防护装备。

凝胶的制备和使用应在适当的温度和时间控制下进行，以确保凝胶的质量和电泳的效果。

以上信息综合了网上的相关内容，以指导如何根据蛋白质的分子量选择合适的分离胶和浓缩胶浓度。

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制：

一般actin以下的可以跑12%胶

红线左右可以用12%或10%跑

几百KD的很大的用6%的胶

小蛋白12%的10%的一般都能跑

分离胶浓度的选择主要取决于目的蛋白的分子量大小，不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，以下表格数值仅供参考

目标蛋白分子量越小，mono/bis百分比越高，目标蛋白分子量越大，mono/bis百分比越小

根据蛋白电泳实验指导的书。
不同浓度的胶对应不同范围分子量的蛋白

浓缩胶浓度基本不变，20-100kda的分子量选择10%，30-120选择8%，20以下选择12%，120以上选择6%