常用酸碱的比重与浓度的关系及常用缓冲液的配
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附 录 一
常用酸碱的比重与浓度的关系 当量浓 配1升1N 名 称 分子量 比重 度 N 溶液所需 （粗略） 毫升数量 氢氧化铵（NH3·H2O） 35.05 0.90 28（以氨计） 15 67 氢氧化钠溶液（NaOH） 40.0 1.5 50.0 19 52 盐酸（Cl） 36.47 1.19 50.0 12.0 84 浓硫酸（H2SO4） 98.09 1.81 95.6 36.0 28 硝酸（HNO3） 63.02 1.42 70.98 16.0 63 磷酸（H2PO4） 98.06 1.71 85.0 15,30,45 67 冰醋酸（CH3COOH） 60.05 1.05 99.5 17.4 59 注：比重（D）、百分浓度（A）与当量浓度（N）之间的关系如下： D×A×10 当量 附录二 常用缓冲液的配制方法 1．广范围的缓冲液（pH） pH 混合液 0.2N NaOH pH 混合液 0.2N NaOH （18℃） （ml） （ml） （18℃） （ml） （ml） 2.6 100 2.0 7.4 100 55.8 2.8 100 4.3 7.6 100 58.6 3.0 100 6.4 7.8 100 61.7 3.2 100 8.3 8.0 100 63.7 3.4 100 10.1 8.2 100 65.6 3.6 100 11.8 8.4 100 67.5 3.8 100 13.7 8.6 100 69.3 4.0 100 15.5 8.8 100 71.0 4.2 100 17.6 9.0 100 72.7 4.4 100 19.9 9.2 100 74.2 4.6 100 22.4 9.4 100 75.9 4.8 100 24.8 9.6 100 77.6 5.0 100 27.1 9.8 100 79.3 5.2 100 29.5 10.0 100 80.8 5.4 100 31.8 10.2 100 82.0 5.6 100 34.4 10.4 100 82.9 5.8 100 36.5 10.6 100 83.9 6.0 100 38.9 10.8 100 84.9 6.2 100 41.2 11.0 100 86.0 6.4 100 43.5 11.2 100 87.7 6.6 100 46.0 11.4 100 88.7 6.8 100 48.3 11.6 100 92.0 7.0 100 50.6 11.8 100 95.0 7.2 100 52.9 12.0 100 99.6 ~undefined混合液的配制：6.008克柠檬酸，3.893克磷酸二氢钾，1.769克硼酸和5.266克巴比妥酸混合溶于1000毫升蒸馏水中，上述四种成份在混合液中的浓度均为0.02875mol/L。 2．柠檬酸－Na2HPO4（Mollvaine）缓冲液，pH2.6~7.6 pH Xml 0.1mol/L柠檬酸 Yml 0.2mol/L Na2HPO4 2.6 89.10 10.90 2.8 84.15 15.85 3.0 79.45 20.55 3.2 75.30 24.70 3.4 71.50 28.50 3.6 67.80 32.20 3.8 64.50 35.50 4.0 61.45 38.55 4.2 58.60 41.40 4.4 55.90 44.10 4.6 53.25 46.75 4.8 50.70 49.30 5.0 48.50 51.50 5.2 46.40 53.60 5.4 44.25 55.75 5.6 42.00 58.00 5.8 39.55 60.45 6.0 36.85 63.15 6.2 33.90 66.10 6.4 30.75 69.25 6.6 27.25 72.75 6.8 22.75 77.25 7.0 17.65 82.35 7.2 13.05 86.95 7.4 9.15 90.85 7.6 6.35 93.65 柠檬酸：C6H8O7·H2O，分子量210.04，0.1mol/L溶液含21.0g/L。Na2HPO4：分子量141.98，0.2mol/L溶液含28.07g/L，或Na2HPO4·2H2O35.61g/L。 3．柠檬酸－柠檬酸三钠缓冲液：pH3.0~6.2 pH Xml 0.1mol/L柠檬酸 Yml0.1mol/L柠檬酸三钠缓冲液 3.0 82.0 18.0 3.2 77.5 22.5 3.4 73.0 27.0 3.6 68.5 31.5 3.8 53.5 36.5 4.0 59.0 41.0 4.2 54.0 46.0 4.4 49.5 50.5 4.6 44.5 55.5 4.8 40.0 60.0 5.0 35.0 65.0 5.2 30.5 69.5 5.4 25.5 74.5 5.6 21.0 79.0 5.8 16.0 84.0 6.0 11.5 88.5 6.2 8.0 92.0 柠檬酸，C6H8O7·H2O，分子量210.04；0.1 mol/L溶液含21.01g/L，柠檬酸三钠， C6H5O7Na3·2H2O，分子量294.12；0.1 mol/L溶液含29.41g/L。 4．醋酸－醋酸钠缓冲液，pH3.7~5.6 pH,18℃ Xml 0.2mol/L NaAc Yml 0.2mol/L HAc 3.7 10.0 90.0 3.8 12.0 88.0 4.0 18.0 82.0 4.2 26.5 73.5 4.4 37.0 63.0 4.6 49.0 51.0 4.8 59.0 41.0 5.0 70.0 30.0 5.2 79.0 21.0 5.4 86.0 14.0 5.6 91.0 9.0 醋酸钠，CH3COOHNa·3H2O；分子量136.09；0.2mol/L溶液含g/L。 5．琥珀酸－NaOH缓冲液，pH3.8~6.0 pH,25℃ Xml 0.2N NaOH 3.8 7.5 4.0 10.0 4.2 13.3 4.4 16.7 4.6 20.0 4.8 23.5 5.0 26.7 5.2 30.3 5.4 32.4 5.6 27.5 5.8 40.7 6.0 43.5 琥珀酸C4H6O4，分子量118.09； 25ml/L琥珀酸（23.62g/L），Xml 0.2N NaOH；用H2O稀释至1000ML。 6．Na2HPO4－NaH2PO4缓冲 液，pH5.8~8.0（25℃） pH,25℃ Xml 0.2mol/L Na2HPO4 Yml 0.2mol/L NaH2PO4 5.8 4.0 46.0 6.0 6.15 43.85 6.2 9.25 40.75 6.4 13.25 36.75 6.6 18.75 31.25 6.8 24.5 25.5 7.0 30.5 19.5 7.2 36.0 14.0 7.4 40.5 9.5 7.6 43.5 6.5 7.8 45.75 4.25 8.0 47.35 2.65 Na2HPO4·2H2O，分子量178.05；0.2mol/L溶液含35.61g/L Na2HPO4·12H2O，分子量358.22；0.2mol/L溶液含71.64g/L Na2HPO4·H2O，分子量138.01；0.2mol/L溶液含72.6g/L NaH2PO4·2H2O，分子量156.03；0.2mol/L溶液含31.21g/L 将Xml 0.2mol/L Na2HPO4·2H2O，与Yml 0.2mol/L NaH2PO4，用H2O稀释至100ml。 7．Clark－Lubs缓冲液（KH2PO4－NaOH），pH5.8－8.0 50ml 0.1mol/L KH2PO4（13.6 g/L）与Xml 0.1mol/L NaOH混合用水稀释至100ml。 pH,25℃ X 缓冲液（β）° 5.80 3.6 5.90 4.6 0.010 6.00 5.6 0.011 6.10 6.8 0.012 6.20 8.1 0.015 6.30 9.7 0.017 6.40 11.6 0.021 6.50 13.9 0.024 6.60 16.4 0.027 6.70 19.3 0.030 6.80 22.4 0.033 6.90 25.9 0.033 7.00 29.1 0.031 7.10 32.1 0.028 7.20 34.7 0.025 7.30 37.0 0.022 7.40 39.1 0.020 7.50 40.9 0.016 7.60 42.4 0.013 7.70 43.5 0.011 7.80 44.5 0.009 7.90 45.3 0.008 8.00 46.1 db dpH 8．三羟甲基甲烷（Tris）－盐酸缓冲液，pH7.1~8.9（25℃） pH,25℃ Xml 0.1mol/L HCl 缓冲值（β） 7.10 45.7 0.010 7.20 44.7 0.012 7.30 43.4 0.013 7.40 42.0 0.015 7.50 40.3 0.017 7.60 38.5 0.018 7.70 36.6 0.020 7.80 34.5 0.023 7.90 32.0 0.027 8.00 29.2 0.029 8.10 26.2 0.031 8.20 22.9 0.031 8.30 19.9 0.029 8.40 17.2 0.026 8.50 14.7 0.024 8.60 12.4 0.022 8.70 10.3 0.020 8.80 8.5 0.016 8.90 7.0 0.014 Tris，C4H12NO3分子量121.14；0.1 mol/L溶液含12.114g/L，将50ml 0.1 mol/L Tris与Xml 0.1 mol/L HCl混合，加H2O稀释至100ml。 9．Clark－Lubs缓冲液（硼酸－NaOH，KCl），pH8.0~10.2 pH,25℃ X 缓冲液（β） 8.00 3.9 8.10 4.9 0.010 8.20 6.0 0.011 8.30 7.2 0.013 8.40 8.6 0.015 8.50 10.1 0.016 8.60 11.8 0.018 8.70 13.7 0.020 8.80 15.8 0.022 8.90 18.1 0.025 9.00 20.8 0.027 9.10 23.6 0.028 9.20 26.4 0.029 9.30 29.3 0.028 9.40 32.1 0.027 9.50 34.6 0.024 9.60 36.0 0.022 9.70 38.9 0.019 9.80 40.6 0.016 9.90 42.2 0.015 10.00 43.7 0.014 10.10 45.0 0.013 10.20 46.2 将50ml含KCl与H3BO3均为0.1mol/L的溶液（KCl 17.445g/L）； H3BO36.184g/L与Xml 0.1mol/L NaOH混合，用H2O稀释至100ml 10．硼酸缓冲液，pH8.1~9.0（25℃） pH,25℃ Xml 0.1mol/L HCl 缓冲值（β） 8.10 19.7 0.009 8.20 18.8 0.010 8.30 17.0 0.011 8.40 16.6 0.012 8.50 15.2 0.015 8.60 13.5 0.018 8.70 11.6 0.020 8.80 9.4 0.023 8.90 7.1 0.024 9.00 4.6 0.026 将50ml 0.025mol/L Na2B4O7·10H2O（9.525g/L）与Xml 0.1mol/L HCl混合，用H2O稀释至100ml。 11．甘氨酸－NaHO缓冲液，pH8.6~10.6（25℃） pH,25℃ Xml 0.2N NaOH 8.6 2.0 8.8 3.0 9.0 4.4 9.2 6.0 9.4 8.4 9.6 11.2 9.8 13.6 10.0 16.0 10.4 19.3 10.6 22.75 甘氨酸，C2H5NO2，分子量75.07 将25ml 0.2mol/L甘氨酸（15.01g/L），与Xml 0.2N NaOH混合，用H2O稀释至100ml。 12．Na2CO3－NaHCO3缓冲液 pH 20℃ 37℃ 9.2 8.8 10 90 9.4 9.1 20 80 9.5 9.4 30 70 9.8 9.5 40 60 9.9 9.7 50 50 10.1 9.9 60 40 10.3 10.1 70 30 10.5 10.3 80 20 10.8 10.6 90 10 Na2CO3·10H2O，分子量286.2；0.1mol/L溶液含28.62g/L Na2CO3 分子量105.99；0.1mol/L溶液含10.6g/L NaHCO3分子量84；0.1mol/L溶液含8.4g/L 13．硼酸缓冲液，pH9.3~10.7（25℃） pH,25℃ Xml 0.1mol/L NaOH 缓冲液（β） 9.30 3.6 0.027 9.40 6.2 0.026 9.50 6.8 0.025 9.60 11.1 0.022 9.70 13.1 0.020 9.80 15.0 0.018 9.90 16.7 0.016 10.00 18.3 0.014 10.10 19.5 0.011 10.20 20.5 0.009 10.30 21.5 0.008 10.40 22.1 0.007 10.50 22.7 0.006 10.60 23.3 0.005 10.70 23.8 0.004 将50ml 0.025mol/L Na2B4O7·10H2O（9.52g/L）与Xml 0.1mol/L NaOH混合，用H2O稀释至100ml。 14．碳酸缓冲液，pH9.7~10.9（25℃） pH,25℃ Xml 0.1mol/L NaOH 缓冲液（β） 9.70 6.2 0.013 9.80 7.6 0.014 9.90 9.1 0.015 10.00 10.7 0.016 10.20 13.8 0.015 10.30 15.2 0.014 10.40 16.5 0.013 10.50 17.8 0.013 10.60 19.1 0.012 10.70 20.2 0.010 10.80 21.2 0.009 10.90 22.0 0.008 将50ml 0.5mol/L NaHCO3（4.208g/L）与Xml 0.1 mol/L NaOH混合，用H2O稀释至100ml。 15．磷酸缓冲液，pH11.0~11.9（25℃） pH,25℃ Xml 0.1 mol/L NaOH 缓冲值（β） 11.00 4.1 0.009 11.10 5.1 0.011 11.20 6.3 0.012 11.30 7.6 0.014 11.40 9.1 0.017 11.50 11.1 0.022 11.60 13.5 0.020 11.70 16.2 0.030 11.80 19.4 0.034 11.90 23.0 0.037 将50ml 0.5mol/L Na2HPO3（7.108g/L）与Xml 0.1 mol/L NaOH混合，用H2O稀释至100ml。 16．纸上蛋白质电泳用的几种缓冲液 pH I 每升溶液中所含组份 4.4 0.2 Na2HPO4，9.44g 柠檬酸10.3g 4.5 0.1 NaCl 3.51g NaAc 3.28g （用HCl调节至pH4.5） 6.5 0.1 KH2PO4 3.11g Na2HPO4 1.49g 7.8 0.12 NaH2PO4·H2O 0.294g Na2HPO4 3.25g 8.6 0.05 二乙基巴比妥酸1.84g 二乙基巴比妥酸钠10.30g 8.6 0.075 二乙基巴比妥酸2.76g 二乙基巴比妥酸钠15.45g 8.6 1.0 二乙基巴比妥酸3.68g 二乙基巴比妥酸钠20.6g 8.9 － Tris 60.5g EDTA 6.0g 硼酸 4.6g (责任编辑：大汉昆仑王) |
