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我的wb内参条带两边是翘起来的,请问怎么回事呢?

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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dnxbz

内参没跑齐,目的条带非特异性条带很多,但其他膜跑出来没有非特异性条带,求大神帮助如何解决

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5 个回答

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天一湖医者

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电泳条带或整体出现 “︶ ”形状,可能原因主要包括两方面。一是电泳速度过快,可通过减少电压等减慢电泳速度。二是电泳温度过高,使得胶变形,可在冷室或者冰浴中进行电泳或者改变电泳pH。

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未来9

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可能是凝胶不均匀冷却,中间冷却不好;电泳系统温度偏高,而且电场强度太大(电泳的电场大致呈现U形,所以因为赶时间而加大电压可能会出现这个

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bamboopiggy

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两边翘,是因为边缘效应,可能你这个槽子用的时间长了,金属丝出问题了,或者是你灌胶不匀。你把电压降低,跑慢点,可能会好看一些。另外,你说的杂带问题,跟一抗关系比较大,是不是抗体坏了?新配一个可能好。

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府宅

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可以调低电压,避免跑胶过快,凝胶过热,可以用冰块降温,或者在冰块上跑。有时候缓冲液反复使用太多次也会出现这种情况,应该及时更换缓冲液。灌胶之后让胶凝固的时间长一点试试(特别是分离胶),还有就是你灌入分离胶之后加入水封闭的过程缓和一点,太急(快)有可能把上层的胶稀释造成胶的浓度不均一,导致两边翘

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dxy_gwrp7ndq

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条带出现 “微笑”现象(中间凹两边翘起):主要是凝胶中间部分凝固不均所致,应待凝胶充分凝固后电泳,或者催化剂加入后没充分混匀

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