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western条带杂出来模模糊糊是为什么?

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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dxy_8urmwag6

1、如图条带很弱,一抗浓度按照说明书推荐的1:2000,上样100ug,就算排除背景干扰条带也很弱...

2、昆虫组织的蛋白提取时用了RIPA强裂解液,是否有必要裂解完去超声破碎?

3、western上样量可以超过100ug吗?

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

你内参不这么模糊吧?你提高一下一抗浓度x,改为1:1000,就好。蛋白上样量太高,你的内参就不好了。

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whilt-shirt

有帮助

有可能是抗体浓度低了,也有可能是样品降解了

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天一湖医者

有帮助

蛋白质样品水解。注意除去蛋白质样品的内源性的水解酶,不要反复冻融。电泳时间过长或过短。溴酚蓝达到分离胶的底部即应该关闭电泳电源。缓冲溶液、sds都要新鲜配制。

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