实验问答4,386,807 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问细胞实验母液如何配置成为工作液？是根据说明书结合文献？我看那种文献配置方法不一

毛利小五郎的徒弟

主要看说明书和预实验的结果，文献只是参考。

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问求助，巨噬细胞体外免疫抑制模型怎么建立？

毛利小五郎的徒弟

一般可以采用干细胞进行诱导构建巨噬细胞体外模型

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问myd88求组

毛利小五郎的徒弟

myd88并不是金标准，这个指标的意义多为参考，主要还是看关键指标的趋势

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问如何验证罕见病原体？

a807989061

利用mNGS技术为临床揪出致病的“元凶”,还依托多技术平台,根据临床诊断需求加做抗体和Sanger测序。可以以Sanger测序、qPCR、全基因组测序(WGS)和数字PCR等多种分子检测技术为主,联用抗原抗体等方法进行验证

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问pcDNA3/B7.1表达载体的构建，如何做

bamboopiggy

直接找公司构建就可以，现在好些测序公司直接给做。要是自己做，先分清楚是人的还是鼠的，然后找相应的细胞，自己提取cDNA，然后pcr 克隆出来，连接到pcDNA3.1载体上就可以。

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问硕士毕业论文综述可不可以用开题报告的内容啊，麻烦知道的大佬告知一下

虫博士的丁香园

可参考，开题报告一般是校内留存的，研究背景可参考。但是毕业论文的内容可能会有丰富或调整，还是需要再看文献再完善的。

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问顺式作用元件

loveliufudan

如果在启动子ATG上游2000bp的序列中没有发现TTTGTT序列，但是在启动子的互补链中发现有这个序列，那说明这个启动子可能含有这个TTTGTT作为转录因子结合元件。你可以通过EMSA实验验证启动子是否与转录因子结合，从而验证启动子是否含有TTTGTT这个元件。在EMSA实验中，转录因子和启动子将通过结合序列（如TTTGTT）结合在一起，形成结合物。如果存在结合，则EMSA实验可以检测到结合物的

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问异嗜性抗原和交叉抗原的区别？

asswei

异嗜性抗原指的是不同种属之间有共同抗原而发生交叉反应，交叉抗原只要求含共同抗原表位。异嗜性抗原不一定是交叉性抗原，异嗜性抗原是异种生物之间，交叉性抗原是指两个抗原有相同的表位。

1 回答155 围观

问免疫组化阴性对照出现阳性结果，可能的原因有哪些呀

刘胖胖看丁香

洗的时候没有分开洗，洗的时候过长

5 回答139 围观

问免疫细胞表面蛋白

dxy_uv8jfkbw

我们实验室从外周单核细胞培养mDCimDC一般在培养D4后表达HLA-DR+、CD86mDC表达HLA-DR+、CD80、CD83、CD86

3 回答157 围观

问做ELISA实验，三遍，复孔之间重复性差异很大是什么原因呢？

dxy_r9ji8ui4

差异大是多大？一般要求不能超过15%，竞争法有时20%也能接受还有不要压着标曲的检测下限去测量，尽量高中低三档同时观察，非压着检测限的值去测，肯定容易重复性差标曲一定要做好，r2＞0.99以后再谈别的，要看计算后的浓度值，不能看OD读值。每次实验标曲必做。标曲拟合方程尽量用4pl，拟合度更好

8 回答368 围观

问启动子结合元件

loveliufudan

是的，这可以说明启动子中含有这个TTTGTT序列作为转录因子结合元件。在DNA序列中，启动子的互补链是与正常的启动子序列相反的链，并且它们的碱基配对情况是可以互相转换的。因此，如果TTTGTT序列只在启动子的互补链中被发现，可以说明这个序列是在启动子正常序列中存在的。但是，需要进一步的研究和验证来证明这个结论。

3 回答161 围观

问大佬们，我刺激物是4个不同的重组蛋白，怎么加呢，每个蛋白10微克/毫升吗？还是每个2.5？

bamboopiggy

你需要做预实验摸一下条件，如果都加10ug，可以就加10ug，不行就要减量

4 回答160 围观

问激光共聚焦扫描显微镜观察ROS荧光强度需要加DAPI染核吗？谢谢

bamboopiggy

最好加上，展示的时候可以不展示，但是如果没有，再补就比较麻烦

3 回答207 围观

问网状meta的p值怎么算

我不是曾博

很疑惑？为什么要给p值？不是都有95%区间了么？

2 回答134 围观

问如何判断一个转录本对应哪一个基因

毛利小五郎的徒弟

大概率是可变剪切形式，可以使用已知的酶去裂解，然后检测裂解片段。

2 回答146 围观

问你好，我有一批乳腺癌的肿瘤组织的样本，我对乳腺癌上表达的一些指标做了免疫组化染色，我想请问一下，如何评分。

汤姆卜丽波

采用半定量结果判断，分别对镜下阳性细胞的百分比与染色强度给予评分。阳性着色细胞数：每张切片上观察5个高倍视野(×200)，计数阳性细胞百分比，阳性细胞数<5％为0分，5％～25％为1分，26％～50％为2分，51％～75％为3分，76％～100％为4分。阳性着色强度：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。两者计分相乘即为阳性等级：0分为阴性(-)，1

3 回答173 围观

问查找内源启动子序列

loveliufudan

要查找非模式生物的内源启动子序列，你需要首先找到这些生物的基因组数据库。你可以使用在线数据库如NCBI的GenBank来查询非模式生物的基因组信息。然后，你可以使用bioinformatics工具，如BLAST来搜索基因组中的启动子序列。另外，你还可以使用专门的启动子预测软件，如PlantProm, PlantCARE, PlantPilot等来预测非模式植物的启动子序列。

1 回答126 围观

问transwel背景像水墨画…有一样的吗，求解决办法

battier01

看一下是不是哪里没有弄干净，小室或者镜头

2 回答128 围观

问流式模板有过一次重建。重建前后补偿发生一定的变化。重建前和重建后的样本是否可以放在一起比较MFI

Marchers

不建议放一起比较，重建前后的模板有补偿的参数差异，存在系统误差。

3 回答82 围观

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