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质粒提取浓度正常,但是比值总是超过2,是什么问题?

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dxy_ujy2vior

A260/A280值总是2.03左右,A260/A280值在2.4左右,重复好几次都是这样,是存在rna还是挑的菌不纯呢

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3 个回答

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sswei

有帮助

a260/a280大于2说明RNA没有除干净。需要对质粒纯化。

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土井挞克树

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考虑是存在干扰rna,建议纯化一下质粒

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loveliufudan

有帮助

正常情况下,DNA和RNA的A260/A280值应接近1.8,而A260/A230值应接近2.0。

如果你的A260/A280值总是在2.03左右,而A260/A230值在2.4左右,有几个可能的解释:

1. 混杂的蛋白质:较高的A260/A280值可能表明存在蛋白质的污染。这可能是因为在提取核酸时,未完全去除与核酸共沉淀的蛋白质。

2. 酶、溶剂或其他杂质:较低的A260/A230值可能表明存在酶、溶剂或其他杂质的污染。这些杂质可能来自于提取过程中使用的试剂、缓冲液或其他实验室条件。

3. 测量误差:在测量A260、A280和A230时,测量的准确性和精确性也可能对结果产生影响。确保测量仪器的校准和操作的准确性是很重要的。

为了进一步确定核酸样品的纯度和是否存在污染,可以考虑以下几点:

1. 重复测量:重复测量样品,确保结果的一致性和稳定性。

2. 使用其他方法进行纯度检测:除了A260/A280和A260/A230比值,还可以尝试其他方法,如琼脂糖凝胶电泳或荧光染料检测,以评估核酸样品的纯度和杂质情况。

3. 重新提取样品:如果怀疑存在严重的污染或提取问题,可以尝试重新提取核酸样品,并注意在提取过程中采取严格的无菌和纯净操作。


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