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简介
来源:丁香实验
操作方法
基 本 方 案 1 磷酸钥/DNA 沉 淀瞬时转染 Phoenix 反转录包裝细胞
免 疫 球 蛋 白 融 合 蛋 白 的 构 建基 本 方 案 1 免疫球蛋白融合蛋白的构建 材 料 编码靶基因的 D N A
单 链 抗 体 的 噬 菌 体 展 示 技 术基 本 方 案 1 全套单链抗体噬菌体载体的构建 材 料 新鲜分离的小鼠脾脏或者 IO7 杂 交 瘤 细 胞(单 元 undefined3) R N A 提取试剂 R T -P C R 试剂 D E P C 水 寡 核 苷 酸 引 物(表 14. 3.1) DNA marker 琼脂糖胶回收试剂盒(Qiaquick Gel Ex
整 体 培 养 中 同 型 转 换 重 排 的 PCR 检测基 本 方 案 1 通过转换接头的直接 PCR 材 料(带 V 项 目 见 附 录 1) 外周血分离的单核细胞(P B M C ; 单 元 8.1) I M D M -I O 完全培养基 重组人 IL-4 (rfIL-4; 表 5. 0 •1)
PCR 检 测 细 胞 因 子 m R N A 的表达基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照:转 录 质 粒 载 体(含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N T P 混合液200U /ul M o - M u L V 反转录酶1 〇 X 无 M g C l 2 P
P C R 检 测 人 T 细 胞 受 体 基 因 的 表 达基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达
P C R 检 测 小 鼠 T 细 胞 受 体 表 达基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达 材 料 正常小鼠的组织匀浆或者 是 H B S S 制备的单个细胞悬液(IO4〜IO7) (附 录 1) 无菌水
多探针核糖核酸酶保护试验同时测定 mRNA 表达基 本 方 案 多 探 针 核 糖 核 酸 酶 保 护 试 验 材 料 R i b o Q u a n t 体 外 转 录 试 剂(B D Pharmingen) 包含下面: 40U /ul RNasin G A C U 库(2.75m m o l / L G T P /2.75m m o l / L A T P / 2.75m m o l / L
端 粒 长 度 和 端 粒 酶 活 性 的 分 析基 本 方 案 I Southern 杂 交 检 测 传 统 凝 胶 电 泳 中 末 端 端 粒 D N A 限制性片段(TRF) 的端粒长度 材 料 基 因 组 D N A (试剂盒分离) 和 限 制 性 内 切 核 酸 酶 和 反 应 缓 冲 液 琼 脂 糖(D N A 级) 1 〇 X T B E 或 T A E 6 X D N A
T C R 库 的 抗 原 谱 / 免 疫 扫 描 技 术 分 析基 本 方 案 1 人 和 小 鼠TCR受体库多样性的免疫扫描技术分析材 料
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