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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
只检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA, 不检查相应的蛋白表达可以吗
周末也要努力呀
一般情况下蛋白和基因都检测及更有说服力
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问
荧光定量显示阈值算法失效
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问
请问NCBI上查找mRNA的CDS序列出现无起始密码子或者终止密码子怎么办?
151 围观
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问
请问qRCR,和RT-qPCR的适用条件是什么?二感觉很相似,如何区分呢?数据结果是不是有区别?
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问
pcr的复孔的CT值的数据处理
221 围观
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问
做定量时,总是由于气密性不好,导致加引物量不准确,重复时差距过大怎么办
88 围观
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问
可以将对照组cDNA稀释20倍,实验组cDNA稀释两倍上定量,让对照组和实验组内参ct值靠近一点吗?
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问
如果做qpcr,我没有对照组,我可以用空白对照组,默认它的ct值为0吗?
266 围观
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问
请问正向引物和反向引物是根据文献而定还是在哪个网站查询?还是交给公司去设计?
106 围观
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问
动物DNA跑PCR凝胶电泳?
86 围观
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问
问一下各位老师,关于PCR实验生物重复性的问题,就是最近重复不出来之前的结果,出现的趋势和之前的不一样,这有些什么原因啊?
dxy_sez82925
样本个体差异造成不同;样本的处理不同;RNA降解等影响,反转录效率差异
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问
MRC-5细胞做qPCR,内参值在22-24之间,可以用嘛?
skyye
重复了多次后内参仍然是22-24之间,那就没其他好的办法了,尝试分析结果看看。内参一般在15左右还是比较好的,也有看到说内参不超过25就可以用的
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问
divergent primers和convergent primers
Drama2
Divergent primers 设计用于跨越circRNA背剪接连接序列的不同引物可以特异性扩增circRNA,而不是对应的线性RNA。
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问
关于这个实验条带结果,请问如何看图呢?
秋秋欣欣
是的,需要做统计学分析,直接对比的话意义不大
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问
请问RNA-seq测序的结果如何进行分析?用什么软件和程序?参考文献有哪些?
毛利小五郎的徒弟
我们一般都选用KEGG,这个软件比较好操作
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问
请问RNA-seq技术的具体流程是怎样的?有哪些文献可以参考?
huarenqiang5
1. workflow进行差异表达基因分析的前提是,获取代表基因表达水平的矩阵。因此在进行分析前,必须知道基因表达矩阵是如何产生的。在本教程中,将会简要的介绍从原始测序读数到基因表达计数矩阵过程中,所采取的不同步骤。下图是整个分析过程的流程图。2. RNA提取与文库制备在对RNA 进行测序前,必须从细胞环境中提取和分离出RNA 制备成cDNA 文库。下面将介绍涉及的许多步骤,其中还包括了质量检查,
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问
为什么我的qPCR结果内参和目的基因的ct值都很高?
huarenqiang5
考虑以下几点原因:1)模板量低或基因表达丰度低。2)qPCR整个反应条件不适宜或引物设计不当。 3)扩增产物过长。
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问
扩增曲线异常-刚跑就有扩增并消失
高山云初
1.扩展失败,应调整反应条件和体系2.退火延伸阶段(60度,1min)存在部分链退火不充分;因此在信号刚开始采集阶段,部分链会继续退火形成双链,荧光信号增强,退火充分后荧光信号达到最大值,此后随着温度的上升,pH降低,导致荧光信号强度降低,反映就是出现沟了3.意味着扩增产物不再是目标序列,而是非特异性扩增了
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问
想问一下,各位前辈,对照组和实验组是两种不同的细胞,但是他们复苏的时间不一样,这样做出来的结果可靠吗?
sswei
对照组和实验组是两种不同的细胞,但是他们复苏的时间不一样,这样做出来的结果不可靠
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问
关于PCR的CT值问题咨询
sswei
CT值为小于35,处于正常值,可使用的。
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