Smile-li
连接产物转化完铺板不长菌,目的片段扩增胶回收浓度30几,载体和片段再双酶切胶回收,载体90左右,目的片段大约也30,再进行连接,连接产物浓度150左右 ,做转化是用的商品化感受态,不长菌要不就是平板长糊了,怎么办,愁死了
申东熙老伯
很可能目的条带和载体没连接上,建议重新连接。不长菌就是没连接上,菌一长一大片可能是平板抗生素失效,也可能是菌液浓度过高。
bamboopiggy
调整一下你插入片段和载体的比例。再就是长糊了,可能是你的抗生素失效了
毛利小五郎的徒弟
注意控制温度,温度太高,细菌会被烫死。