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科研学霸天团,48小时有问必答
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分泌性蛋白超滤浓缩后做WB
高山云初
可以将体积浓缩至20倍以下,再定量到同一体积。需要外泌体内参。是用BCA检测,检测不到可能是因为标准液的浓度不匹配,建议对浓缩后的蛋白进行小体积稀释,可以多测几个稀释度的浓度定量更准
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问
要做已知蛋白的蛋白质组学需要怎么处理细胞?
小小小小小芳
在保证蛋白提取效果的情况下,尽可能用简单的处理方法提取蛋白;高丰度蛋白是质谱检测的头号大敌,在实验中要尽可能的减少引入高丰度蛋白的可能;SDS等去污剂与后续质谱不兼容,提取蛋白时需要慎用,上质谱前必须去除;提取出蛋白后需要妥善保管和保存蛋白液,尽量避免反复冻融导致的蛋白降解;样本种类复杂,各类前处理方法需要灵活搭配使用。
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问
求助好投的骨科杂志推荐
周末也要努力呀
排名 期刊名称 2022IF 1 Journal of Physiotherapy 12.1 2 Osteoarthritis and Cartilage 3 Journal of Orthopaedic Translation 6.6 4 JOURNAL OF BONE AND MINERALRESEARCH 6.2 5 JOURNAL OF ORTHOPAEDIC & SPORTS P
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问
对细胞进行加小分子抑制剂处理,刚开始做了细胞实验有效,后来重新购买药无效了是什么原因呢?
balalaLy
除了跟不同批次药物的影响有关之外,跟细胞的状态也有关。比如传代次数太多细胞老化,对药物的敏感性会改变。
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问
如何快速有效地进行通路筛选?
sswei
一、信号通路分析中信号接收阶段的检测测定候选药物引起靶点蛋白最初的变化,最常见的是候选药物和位于细胞膜上的靶点受体的结合,或者阻断靶点受体和天然配体的结合,如靶点蛋白结合。一般而言被考虑是部分表型,信号通路分析蛋白–蛋白相互作用链接一个复杂的网络至转录激活和一个报告基因的表达(如荧光素酶,β-内酰胺酶或酶互补耦合)或荧光蛋白(GFP和YFP),产生一个可测量的发光或荧光信号。有别于将靶点受体重组纯
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问
4D-DIA蛋白组学技术的估价大概是多少?
sswei
4D-DIA定量蛋白质组学不同厂家有不同价格,价格从2500一10000元不等。
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问
如果多个蛋白分子量很接近,切胶做质谱鉴定,可以鉴定出多个蛋白吗?
高山云初
这个要根据蛋白上样量以及胶的浓度而定吧。你可以把上样量调低一些,使这几种种蛋白不出现聚团的情况。
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问
全谱分析和定量分析分别能鉴定到多少蛋白?
高山云初
一般情况下,常规样本全谱分析能鉴定到1000~3000个蛋白,定量蛋白质组学能鉴定到2000~6000个蛋白。
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问
不同的数据处理软件对于不同质谱仪器产生的数据是否有偏好性?哪些搭配比较好?如果选择更合适的数据库进行搜库?
huarenqiang5
是的,不同的数据处理软件对于不同质谱仪器产生的数据存在一定的差异。
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问
细胞数2万离心后看不到细胞,有什么办法?需要离心后加入其他液体…
晓雨知春来
有可能是转速太高,细胞破碎死亡了。
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问
图片类型的ppt如何才能变得可编辑
小小翻车鱼
要让图片类型的 PPT 文件变得可编辑,可以尝试以下几种方法:1. 使用其他软件转换:您可以尝试将 PPT 文件转换为另一种格式,如 HTML 或 PDF。然后将转换后的文件导入到 PowerPoint 中,这样您就可以编辑其中的文本和图形了。有许多在线工具可以帮助您完成这个任务,例如 Zamzar或者 Smallpdf。2. 使用 OCR(光学字符识别)技术:如果 PPT 文件中的文本是以图片形
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问
有没有可能,某个转录因子对下游分子表达的影响在不同组织不一样呢?在这个组织细胞是上调,另一个是下
huarenqiang5
存在这个现象,某个转录因子对下游分子表达的影响在不同的组织是不一样的。
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问
GC-MS非靶向检测样品前处理有标准流程吗?
huarenqiang5
你的这个情况建议联系工程师进行处理。
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问
浆母细胞膜上和记忆性B细胞膜上有哪些标记?例如CD19.CD20.CD21等?
huarenqiang5
浆细胞抗原(PC-1),可视为浆细胞抗原区别于淋巴细胞的主要膜标志。
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问
RAW264.7转染快两个月了,用的吉凯的慢病毒,转染效率还是特别低,有没有大神给我指导一下啊?快疯
毛利小五郎的徒弟
可以提高转染的浓度和时间,通常都是时间不足
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问
给动物加强免疫后用流式分选出单个b细胞,分到的b细胞是?
毛利小五郎的徒弟
一般初期阶段都是记忆b细胞,后期是其他分群的b细胞
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问
GC-MS非靶向检测,样品需要做衍生化,加一个内标够吗?
周末也要努力呀
我们做的细菌的GCMS,一个是够的,我们一般使用核糖醇作为内标
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问
RNAscope目标探针没有信号 目标基因pcr的ct值25,wb和IF也做了。探针做不出来。1:阳对,2:阴对,3:目标探针
huarenqiang5
样本处理过程中可能存在破坏RNA分子的情况,如过度切片或超声波破碎等。此外,如果样本冷冻或固定的时间太久,也可能导致RNA分子的降解。RNAscope实验操作问题:实验过程中可能存在RNA适配体和探针的浓度不足、杂交温度或时间不当等问题。另外,使用的探针可能不够特异性,也可能导致信号不明显。仪器问题:如果使用的显微镜或成像系统设置不当,也可能导致信号不清晰或无法观察到。
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问
兄弟们,关于使用通路激活剂,怎么确定最佳浓度啊
balalaLy
看这个通路里边的经典蛋白的变化
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问
组学关于组学lasso降维,以及预处理方法如何选择
晓雨知春来
组学lasso降维对于高维数据,特别是组学数据,非常有用,它可以帮助我们筛选出与目标变量最相关的特征,并去除噪声。常用的预处理方法有有数据标准化、缺失值处理、数据变换、批次效应校正、数据平滑等。可以根据不同的需要进行选择。
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