RNAscope目标探针没有信号 目标基因pcr的ct值25，wb和IF也做了。探针做不出来。1:阳对，2:阴对，3:目标探针

序列与探针类似的片段产生了干扰就容易出现这种情况

如果Pcr和荧光以及WB都做的趋势结果是对的，探针始终做不出来，建议更换探针，说明探针特异性不好。一般来讲大于两种方法验证同一个目的已经够了。

样本处理过程中可能存在破坏RNA分子的情况，如过度切片或超声波破碎等。此外，如果样本冷冻或固定的时间太久，也可能导致RNA分子的降解。

RNAscope实验操作问题：实验过程中可能存在RNA适配体和探针的浓度不足、杂交温度或时间不当等问题。另外，使用的探针可能不够特异性，也可能导致信号不明显。

仪器问题：如果使用的显微镜或成像系统设置不当，也可能导致信号不清晰或无法观察到。