实验问答17,088,694 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问大鼠心电问题

Eason老歌迷

可能会影响对结果判定的准确性，大鼠标准肢体导联比较杂乱，对心肌缺血的判定也很不是很敏感。可以用胸导联试一试，你可以找3只5.1K或5.6K的精密电阻（误差<0.5%）。将3只电阻的一端绞在一起，接生物放大器输入“－”极。生物放大器输入“＋”极，接胸导联的某个部位，如V3或V4。生物放大器输入“地”极，接动物右下肢。这样就可得到比上述ECG漂亮的胸导联ECG图

1 回答160 围观

问遇到一个病例，APTT一直100多，用当天凝血正常的血浆10人做正常混合血浆

Eason老歌迷

建议你参看一下这篇文章，鼓楼医院写的，”《出血与止血系列讲座》第三讲：凝血实验中的APTT纠正实验”。我之前也遇到过一个这样的情况。

2 回答295 围观

问microRNA有没有转染量多促进靶基因表达，转染量低抑制靶基因表达的现象

bamboopiggy

你用luciferase实验验证一下它们之间的相互关系。microRNA mimics下调蛋白的表达，这个是定论。感觉你要么是mimics有问题，要么是你的目的蛋白的wb有问题。

2 回答247 围观

问抑郁模型夹尾实验，小鼠使用什么夹尾呢？

bamboopiggy

可以用动脉夹，或者在止血钳上缠上胶布以后再去夹鼠尾

5 回答2180 围观

问请问提取植物总蛋白的方法有哪些？

你好几和户

提取方法主要有SDS-PAGE loading buffer煮沸法、苯酚提取法、TCA丙酮沉淀法等。

2 回答442 围观

问microRNA过表达后与靶蛋白表达升高？

bamboopiggy

一般加入microRNA 的mimics以后，蛋白是会降低的。你先确保你wb的实验没问题，内参齐。然后另外找个公司再合成一个mimics试试，可能是mimics的合成有问题

3 回答675 围观

问用PEG6000纯化慢病毒没有沉淀

bamboopiggy

我用的是PEG8000，但是原理是一样的，你对光看一下管子的侧壁，尤其是15ml管，有的时候，沉淀会直接挂在侧壁

4 回答1948 围观

问蛋白跑胶

bamboopiggy

可能是你蛋白的浓度太高了，或者是蛋白出现降解了。

3 回答254 围观

问流式，凋亡，BD C6流式细胞仪，凋亡试剂盒Elabscience

Eason老歌迷

如果你做了几次都是这样，可能跟几方面有关系：所用细胞状态欠佳、干预因素的浓度或者干预时间还需要优化、收集细胞期间操作不恰当对细胞的损伤等等。

1 回答253 围观

问MCAO造模染色，发现非栓塞侧半脑不够红是为什么？

bamboopiggy

1.你染色用的ttc，用多久了？最好新配吧。2.浓度你用对了么？一般是2%的。

1 回答334 围观

问取材完来不及做流式的组织如何保存呢？-80可以吗？

bamboopiggy

绝对不能-80，一旦-80.你就没法再用了。流式一般用新鲜的细胞，实在做不完，你放4度保存都比-80好

2 回答1229 围观

问粪便DNA提取过程中需要无菌操作吗？比如说提取过程中的枪头需要高压灭菌处理吗？

whilt-shirt

最好还是灭菌的枪头，避免DNA酶的影响

2 回答1231 围观

问N糖分析时，G1F旁有三个峰，质谱显示分子量是一样的，所以存在3种G1F异构体吗？可能是怎么样的连结方式？

Eason老歌迷

三个峰?想问一下你用的什么柱子？另外如果你的峰拖尾的很厉害，那么在后一个峰中很可能包含有你的单抗分子。可能并不一定是三种异构体，如果可以的话，建议你做三次重复实验看看。

1 回答327 围观

问我们在做游离O糖的时候，经过2-AB标记后，进质谱通过一级分子量来分析糖型，发现有的一级分子量匹配的是未标记上2AB的核心O糖结

187 围观

问22克左右的裸鼠，皮下接肿瘤细胞，能长出瘤子吗？

balalaLy

4-6周接瘤，长10天左右再给药，就差不多了。太大了瘤子长不起来

3 回答755 围观

问原核蛋白pET32a诱导表达

Eason老歌迷

也有可能是分子伴侣。也可以你的目的蛋白有降解了。

2 回答1058 围观

问外泌体超滤管选择

Eason老歌迷

使用100Kd超滤管浓缩细胞上清保留内管液体。我师兄发明的一种提取外泌体方法。如下:用含无外泌体血清的培养基培养细胞得到培养上清液，所述培养上清液中含有外泌体。进行第一离心处理后，取上清进行第二离心处理，然后取上清得到离心液；将所述离心液用100kd超滤管进行超滤浓缩处理，得到超滤液；将所述超滤液进行第三离心处理后，用0.22μm过滤器进行过滤除菌处理，得到浓缩液；将所述浓缩液进行第四离心处理，弃

3 回答6369 围观

问萌新求教流式细胞术检测CD4,CD8计数

Eason老歌迷

你这几个问题，我做一个统一回复。需要肝素抗凝静脉血1ml，不同荧光素标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，同型阴性对照荧光物，溶血剂，固定剂，流式细胞仪。具体操作1、100μ1抗凝血加20μl荧光单克隆抗体，同时做阴性对照。2、避光室温作用20min，溶去红细胞后，固定剂固定。3、上流式细胞仪测定，以阴性对照测出本底参数，调节荧光补偿，设定阳性参数值，软件将计算出阳性表达细胞比例。需要注意1、

2 回答484 围观

问蛋白互作调控

Eason老歌迷

这个很好理解啊，细胞调控又不是光只有它两个蛋白，还有c还有d，可能c，d影响着a，b之间的这种作用呢

1 回答375 围观

问有没有伙伴做短链脂肪酸干预细胞的，怎么配置里面的短链脂肪酸，比例是多少？

Eason老歌迷

短链脂肪酸（SCFA）又被称作挥发性脂肪酸（VFA），评价标准在于碳链中碳原子的数量，我们将碳原子数量在2-6之间的有机酸称为短链脂肪酸，其名称分别为，乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸。具体的配制方法，请参考这篇文献方法部分”短链脂肪酸影响B细胞表观遗传修饰以调节抗体应答‘’

1 回答251 围观

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