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用PEG6000纯化慢病毒没有沉淀

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Mocking_bird

用10cm皿包病毒,用PEG6000纯化病毒。先加入终浓度0.5M的NaCl,再加入等体积10%的PEG6000,混匀。4℃放置3小时,每隔30min混匀一次。4℃ 7000g离心20min,但是没看到沉淀,是什么原因?是病毒量太少?

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4 个回答

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bamboopiggy

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我用的是PEG8000,但是原理是一样的,你对光看一下管子的侧壁,尤其是15ml管,有的时候,沉淀会直接挂在侧壁

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dxy_gwrp7ndq

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用超速离心机浓缩病毒,超速离心14000g,4hr

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府宅

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少量的病毒是看不到的,能看到沉淀也不是病毒,是蛋白碎片

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Eason老歌迷

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病毒上清加了peg后,protocal上说每20~30min混合一次,共进行3-5次然后4度静置过夜后,其实直接4度静置过夜也没事。peg沉淀过夜后4000 g,离心 20min,如果看不到沉淀,可以10000g离心半小时以上,就能看到沉淀了,总的来说,peg过夜沉淀后离心一般都是能看到沉淀的,但滴度高低跟沉淀多少是没关系的,

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