实验问答17,088,694 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问基因变异位点有RS号,但是未有文献报到过,算新变异吗?

sswei

通过对新变异位点结构、功能等情况进一步研究来说明。

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问冰冻切片p-smad2/3免疫荧光染上了吗

balalaLy

这种染色看着像组织的自体荧光。要判断是否阳性染色得看阴性对照。

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问怎样让给药后的细胞恢复状态细胞给药低浓度的顺铂24小时后撤药，细胞恢复不了之前的

毛利小五郎的徒弟

可以撤掉药物给细胞间歇期，然后加用pbs冲洗加速恢复

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问二硫化物应激

sswei

由细胞内过量胱氨酸积累引起的二硫化物应激导致的快速死亡方式。

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问转染和乙醇刺激先后顺序，求回答！！！

loveliufudan

在你的实验中，转染与乙醇刺激的先后顺序可能会影响结果。由于你是先转染再加入乙醇刺激，可能导致细胞在受到乙醇刺激前就已经开始进行基因表达的调控。因此，建议你在先乙醇刺激一段时间后再进行SiRNA转染。具体而言，你可以先将细胞培养到一定密度后，加入预先测定好的最佳乙醇浓度并继续培养48小时，然后再进行SiRNA转染。转染后继续培养48小时，最后提取RNA和蛋白质进行检测。此外，建议你在实验设计中加入一

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问茜素红染色求助

loveliufudan

黑色的渣渣可能是骨基质或者矿化的结节。而死细胞团通常不会染上茜素红，因为茜素红是染色骨基质和骨细胞的染料。如果您的样品是骨组织或者骨细胞的话，这些黑色的渣渣可能是正常的。不过为了确定这些渣渣的成分，您可以使用其他染料或者方法进行验证。

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问Uuo模型的假手术组是在假手术后1天处死还是第14天？

毛利小五郎的徒弟

Uuo模型的假手术组是在假手术后14天和28天处死

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问L-色氨酸如何加入LB培养基

sswei

色氨酸一般是在稀酸或稀碱溶液中溶解，然后加入培养基。

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问测MDA时，TBA配置时溶解了，但在4℃保存时又有晶体析出是为什么，会影响测定结果吗？

loveliufudan

如果在TBA配置时发生了溶解，但在保存时又有晶体析出，可能是因为TBA在配制时被过度加热或过度搅拌，导致其在水中溶解度增加，但在降温和停止搅拌后，TBA的溶解度会下降，导致晶体析出。这种晶体可能会影响测定结果，因为它们可能会干扰TBA试剂与其他物质的反应。为了最小化晶体对测定结果的影响，建议您在进行MDA测定之前先过滤掉晶体，以确保测定中只有溶解的TBA试剂。另外，请确保在TBA配制过程中避免过度

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问蛋白挂柱洗脱不下来请问怎么处理

loveliufudan

以下是可能的解决方案：尝试调整醋酸钠的浓度和NaCl的浓度：您可以尝试减少NaCl的浓度，例如使用250mM NaCl或更低的浓度进行洗脱。另外，您可以尝试增加醋酸钠的浓度，例如使用100mM或更高的浓度。如果您的试剂可以承受更高的醋酸浓度，您还可以尝试使用更高浓度的醋酸（例如0.2 M或更高）。尝试调整洗脱缓冲液的pH：您可以尝试在不同的pH值下进行洗脱。除了pH4，您还可以尝试pH3或更低的条

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问如何进行抗原表位筛选？

loveliufudan

对于筛选T/B细胞抗原表位的问题，以下是一些常用的软件和方法：IEDB（The Immune Epitope Database）：IEDB是一个公共数据库，收集了人类和其他物种中已知的T/B细胞表位信息。可以使用该数据库中的工具进行序列分析和抗原表位预测。可以使用IEDB中的线性和非线性预测工具，例如BepiPred、NetMHC、NetCTL等。DiscoTope：DiscoTope是一个基于机

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问Gateway反应的引物是怎么设计的？需要加上attB这个没看懂

loveliufudan

在Gateway克隆技术中，attB位点是重要的克隆元件，它位于载体和DNA片段之间，是介导DNA片段定向插入载体的关键元素。因此，在进行Gateway反应时，需要使用含有attB位点的引物，以引导目标DNA的定向克隆。通常情况下，引物设计可以遵循以下步骤：根据目标DNA片段的序列，选择包含attB位点序列的引物。这些引物通常被称为Gateway入口引物或attB引物。设计引物时需要考虑attB位

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问pAT03-Apr是什么特性？重组酶表达质粒

loveliufudan

pAT03-Apr是一种重组质粒，可用于大肠杆菌中表达重组酶。该质粒包含多个重要元件，包括：起始子和终止子：用于启动和终止转录过程。多克隆位点：用于方便地插入目标基因的DNA序列。T7启动子：用于诱导T7 RNA聚合酶的表达。带有6个组氨酸标签（6xHis-tag）的启动子和终止子：用于方便地将重组蛋白纯化。胰凝乳蛋白酶切位点：用于释放表达的重组蛋白。因此，pAT03-Apr质粒可以方便地克隆目标

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问中药入血成分内标物选择

sswei

在排除误差后，可选用该物做内标。

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问[求助]小鼠肝脏缺血再灌注模型

alimGYR

你好，你的模型怎么样了，我的模型生化指标很理想，但是he染色he免疫组化感觉没有损伤和凋亡

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问nissl染色，海马一直裂口

loveliufudan

出现裂口、断裂的可能原因如下：组织处理过程中损伤导致。如固定不足、处理时间过长、处理过程中机械振荡等都可能导致组织细胞裂口。切片过程中操作不当，如切片厚度不均、切片时候挤压组织等。石蜡切片加热时间过长或过高，导致组织脱水过度。针对以上可能原因，可以采取以下措施避免裂口的产生：在处理组织时，注意固定充分、处理时间控制、避免机械损伤等。切片前要进行组织的均匀包埋和切片厚度的控制，切片时不要挤压组织。石

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问求助 SD大鼠高脂诱导胰岛素抵抗

loveliufudan

SD大鼠60%高脂饲料诱导可以导致胰岛素抵抗和糖代谢异常，而OGTT测试可以用来评估机体的葡萄糖耐受性。如果在第6周的OGTT测试中发现异常，这意味着这些SD大鼠可能已经出现了胰岛素抵抗和/或糖代谢异常的迹象。但在第17周再次进行OGTT测试时，如果没有发现异常，这可能是由于以下原因：大鼠的身体已经适应了高脂饲料，改变了其代谢途径，使其在更长的时间内维持了较好的糖代谢能力。大鼠可能已经发展出代偿性

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问一个公认的抑癌基因，但是在某个癌中高表达，并且表达越高预后越差

loveliufudan

这种情况通常可以解释为在不同类型的肿瘤中，同一个基因可能会发挥不同的作用。在正常组织中，这个基因可能发挥抑癌的作用，但在某些特定类型的癌症中，由于其他基因的改变或某些环境因素的影响，这个基因的功能可能被转化为促进肿瘤发展。另外，有些基因的表达可能会在不同的肿瘤类型中表现出差异，因此这个基因在某个癌症中的表达水平高，并不一定代表它在其他类型的癌症中也会高表达。此外，一些研究还表明，在某些情况下，高表

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问脑组织He病理

loveliufudan

正常大鼠皮质中存在神经元变性的情况比较罕见，但是在老龄化大鼠中神经元变性和神经元丢失是比较普遍的现象。这些变化可能是与年龄相关的自然退化过程的一部分，与神经元的生命周期有关。此外，胼胝体疏松也是正常的老化过程之一。胼胝体是大脑中的一个白质结构，它主要由神经纤维和胶质细胞组成。随着年龄的增长，胼胝体中的神经纤维数量可能会减少，这可能导致胼胝体的疏松和萎缩。虽然神经元变性和胼胝体疏松都是正常的老化过程

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问求助：羊口疮病毒OrfV

来一起探讨

可以向本省的畜牧兽医科学院或省动物疫病预防控制中心咨询一下

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