Gateway反应的引物是怎么设计的？需要加上attB这个没看懂

在Gateway克隆技术中，attB位点是重要的克隆元件，它位于载体和DNA片段之间，是介导DNA片段定向插入载体的关键元素。因此，在进行Gateway反应时，需要使用含有attB位点的引物，以引导目标DNA的定向克隆。通常情况下，引物设计可以遵循以下步骤：

根据目标DNA片段的序列，选择包含attB位点序列的引物。这些引物通常被称为Gateway入口引物或attB引物。

设计引物时需要考虑attB位点的序列和位置。attB位点有两种序列：attB1和attB2，它们位于目标DNA片段的两端。因此，需要设计两个引物，一个针对attB1位点，另一个针对attB2位点。

引物的序列应该满足PCR引物设计的一般原则，如避免hairpin和dimer的形成、优化引物长度和温度等。

需要注意的是，Gateway反应的引物中含有attB序列，但PCR扩增时不需要添加attB位点。通常情况下，attB序列会在PCR扩增过程中被引物所扩增。完成PCR扩增后，目标DNA片段已经包含attB位点，并可以直接进行Gateway克隆反应。

用snapgene软件设计，按照步骤添加克隆基因就行