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最近用石蜡切片进行尼氏染色,结果镜下总是有裂口,海马断裂,想请教各位,原因是啥
石蜡切片(40度展片,60°烤4h或者37°过夜都试过)
脱腊复水(二甲苯10min,三次;无水乙醇5min;95乙醇2min;85乙醇2min;75乙醇2min)
尼氏染色剂10min
脱水(95乙醇2min,两次;二甲苯5min,两次)也试过(70乙醇2秒;80乙醇2秒;85乙醇2秒;90乙醇2分钟;95乙醇2分钟,两次;无水乙醇2分钟,两次;二甲苯1分钟,两次;)
中性树胶封片
loveliufudan
出现裂口、断裂的可能原因如下:
组织处理过程中损伤导致。如固定不足、处理时间过长、处理过程中机械振荡等都可能导致组织细胞裂口。
切片过程中操作不当,如切片厚度不均、切片时候挤压组织等。
石蜡切片加热时间过长或过高,导致组织脱水过度。
针对以上可能原因,可以采取以下措施避免裂口的产生:
在处理组织时,注意固定充分、处理时间控制、避免机械损伤等。
切片前要进行组织的均匀包埋和切片厚度的控制,切片时不要挤压组织。
石蜡切片加热时温度和时间控制在合适的范围内,避免过度脱水。
另外,如果出现裂口或断裂的情况,可以尝试重新制备组织切片,或者在染色前尝试修复裂口部位。
土井挞克树
减少脱水时间,脱水过度就会裂口。
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