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外泌体提取纯化

实验分类:

免疫学实验

最新修订时间:

简介

外泌体提取纯化

来源:

操作方法

外泌体提取纯化(细胞上清)

一、样品预处理1、取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;2、样品初始用量:(单次提取时的样品量)样品名称最低量细胞培养上清液20 mL3、离心去细胞颗粒:将样品转移至离心管中,于4℃以3000 g离心10 min,去除样品中的细胞颗粒;(注:若沉淀较多,可3000 g,10 min重复离心1次,取离心上清液。)4、

外泌体提取纯化(尿液)

一、样品预处理1. 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25℃ 水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;2. 样品初始用量: 样品名称最低量尿液25mL3. 离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于 4℃ 以 3000g 离心 10min,去除样品中的细胞碎片;(注:若沉淀较多,可 3000g/10min 离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液)4. 上清

外泌体提取纯化(血液)

一、样品预处理1、取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25 ℃ 水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;2、样品初始用量:(单次提取时的样品量)样品名称最低量血清0.2 mL血浆0.2 mL3、离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于 4 ℃ 以 3 000 g 离心 10 min,去除样品中的细胞碎片;4、上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新的离

外泌体提取纯化(体液)

一、样品预处理1. 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25℃ 水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;2. 样品初始用量:(单次提取时的样品量)样品名称最低量肺泡灌洗液1.0 mL腹水1.0 mL3. 离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于 4℃ 以 3000g 离心 10min,去除样品中的细胞碎片;4. 上清液转移:去除细胞碎片的离心上清液转移到新

外泌体提取纯化(乳液)

一、样品预处理1. 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25℃ 水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;2. 样品初始用量:(单次提取时的样品量)样品名称单次最佳处理体积乳液50 mL3. 离心去脂:将样品转移至离心管中,于 4℃ 以 10000g 离心 20min,去除样品中的脂质及部分蛋白;(注:离心后样品分为三层,上层为脂质层,下层为蛋白沉淀,中间层

外泌体提取纯化(血清-血浆)

一、样品预处理:1、离心机在使用前先于 4 ℃ 预冷 10 min;2、取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 2 ~ 8 ℃ 条件下进行解冻;如果是新鲜样品,收集样品后置于 2~8 ℃ 保存;3、将样品按照 500 μL /管进行分装,不足部分用 1×PBS 补足至 500 μL。样品类型单管处理体积血清/血浆 0.5 mL /管。二、去除杂蛋白:1、Solution A 从试剂盒中取出后,放置到

外泌体提取纯化(粪便)

一、样品预处理(1)粪便样本收集在无菌的宽口容器中,立即使用(收集样品后置于冰上)或冷藏(4°C)。(2)使用勺子将 3g 的粪便转移到预先称重的离心管中,向试管中加入预冷(2℃ ~ 8℃)的 30 毫升无内毒素 PBS(按照每1g 粪便对应 10 毫升 PBS 加入)。(3)通过涡旋振荡器充分混匀粪便样本 5 分钟。在此步骤中,将高速离心机和离心转子冷却至 4°C。(4)将混匀粪便的离心管放入高

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