感受态细胞的制备及其转化

质粒转染大肠杆菌可应用于：（1）细菌株的构建；（2）细胞工程；

本实验主要用于制备感受态E.coli TG1细胞。

磷酸钙法转染HEK293T细胞可应用于：（1）研究转染哺乳动物细胞的机理；（2）基因工程。

MTT 法，又称 MTT 比色法，可以用于：检测细胞存活和生长。

细胞转染方法之一

农杆菌感受态细胞制备可用于：（1）建立农杆菌转化体系；（2）农杆菌表达系统构建；（3）农杆菌其他分子生物学研究。

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于：（1）建立枯草芽孢杆菌转化体系；（2）其基因改造；（3）提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。

利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片断的克隆菌落。

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。

细胞瞬时转染可用于（1）观察目的基因功能（2）表达蛋白在某种细胞中的功能（短时间即可进行观察，但效应会很快丢失）。

电转化流程适用于（1）转基因（2）基因介导（3）基因修复。

细胞转染可应用于：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）转基因动植物；（3）生物制药、基因治疗、RNA干扰。