枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备实验

实验分类：

感受态细胞的制备及其转化

最新修订时间：2022-02-10

简介

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于：（1）建立枯草芽孢杆菌转化体系；（2）其基因改造；（3）提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。

来源：丁香实验

操作方法

化学法

一、试剂配制 1. SP 盐 0.2%( NH4 )2SO4，1.4% K2HPO4，0.6% KH2PO4， 0.02% MgSO4·7H2O， 0.1% 柠檬酸钠。 2. CAYE (100x) 2% Casamino acid，10%酵母膏。 3. SPI 培养基 SP 盐溶液加入1 %体积浓度为50%葡萄糖溶液，1 %体积100xCAYE 溶液

化学改进法

一、实验材料准备 1. 枯草芽孢杆菌感受态制备用贮存液（1）10xSpizizen salts母液： 15% K2HPO4·3H2O，6% KH2PO4，2% (NH4 ) 2 SO4，0.2% MgSO4，1% 柠檬酸钠，溶于蒸馏水中，6.6 x104 Pa高压灭菌，室温贮存。（2）10% 酵母粉、1% 水解酪蛋白和25 mmo l /LMgCl2， 6.6