脂质体转染

感受态细胞的制备及其转化

最新修订时间：2022-02-10

简介

细胞转染方法之一

原理

脂质体((Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具，已经研究的十分广泛，用合成的阳离子脂类包裹DNA，同样可以通过融合而进人细胞。使用脂质体将DNA带人不同类型的真核细胞，与其它方法相比，有较高的效率和较好的重复性。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。

应用

细胞转染

来源：丁香实验

操作方法

🔥 脂质体转染

（1）细胞培养：取 6 孔培养板（或用 35 mm 培养皿），向每孔中加入 2 mL 含 1~2×105 个细胞培养液，37 ℃ CO2 培养至 40%~60% 汇合时（汇合过度，转染后不利筛选细胞）。（2）转染液制备：在 EP 管中制备以下两液（为转染每一个孔细胞所用的量）。A 液：用不含血清培养基稀释 1~10 μg DNA，总量 100 μL；B 液：用不含血清培养基稀释 3 倍体积的转染试