质粒转化大肠杆菌

实验分类：

感受态细胞的制备及其转化

最新修订时间：2023-05-07

简介

质粒转染大肠杆菌可应用于：（1）细菌株的构建；（2）细胞工程；

来源：丁香实验

操作方法

质粒转染大肠杆菌

一、转染1. 从-70℃ 冰箱中取 200μl 感受态细胞悬液，室温下使其解冻，解冻后立即置冰上2. 加入质粒 DNA 溶液（含量不超过 50ng，体积不超过 10μl），轻轻摇匀，冰上放置 30 分钟后。3.42℃ 水浴中热击 45s/90s，热击后迅速置于冰上冷却 3-5 分钟。4. 向管中加入 1 mlLB 液体培养基（不含 Amp），混匀后 37℃ 振荡培养 1 小时，使细菌恢复正常生长状

质粒转染法

一、转染1. 从-70℃ 冰箱中取 200μl 感受态细胞悬液，室温下使其解冻，解冻后立即置冰上。2. 加入质粒 DNA 溶液（含量不超过 50ng，体积不超过 10μl），轻轻摇匀，冰上放置 30 分钟后。3.42℃ 水浴中热击 45s/90s，热击后迅速置于冰上冷却 3-5 分钟。4. 向管中加入 1 mlLB 液体培养基（不含 Amp），混匀后 37℃ 振荡培养 1 小时，使细菌恢复正常生长