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PCR-SSP 分析实验
PCR 序列特异性引物分析法可以用于:(1)特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性。(2)检测MN 基因型。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
序列特异性引物 PCR
序列特异性引物 PCR,英文名是 sequence specific primer, PCR-SSP,是基于核酸序列识别的方法。PCR-SSP 方法是设计出一整套等位基因组特异性引物,借助 PCR 技术获得 HLA 型别特异的扩增产物,通过电泳直接分析带型决定 HLA 型别,从而大大简化了实验步骤。优点是简单易行,分辨率可从低到高,成本低。缺点是不易自动化,不能检测新的等位基因,试剂盒需不断升级,合成多对 HLA 等位基因特异性的引物一次性投资较大。此方法适宜零散和纯度低样本,重复实验时要重提
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PCR-SSP分析实验
根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3′端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。
操作方法所属实验:PCR-SSP 分析实验
序列特异性引物 PCR
序列特异性引物 PCR,英文名是 sequence specific primer, PCR-SSP,借助 PCR 技术获得 HLA 型别特异的扩增产物,可通过电泳直接分析带型决定 HLA 型别,从而大大简化了实验步骤,具有简单易行的优点,分辨率可从低到高,成本低,在 HLA 分型中得到了广泛应用。
操作方法所属实验:序列特异性引物 PCR
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PCR/SSP技术

型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecificoligonucleotide)探针又能探测出等位基因间1~2个核苷酸的差异,故PCR/SSO技术具有灵敏度、特异性强、需样本量少等优点。3. PCR/SSP技术 目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异

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HLA Typing by SSO and SSP Methods

Human leukocyte antigen (HLA) typing, utilising the sequence-specific oligonucleotide (SSO) and sequence-specific primer (SSP) technologies, has been in routine use in many tissue typing laboratories worldwide for more than 20 years

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准备供体材料
下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小麦亚族 Triticeae;硬粒小麦品种 T.turgidum ssp 和小大麦(见注 23 和注 24 )。1. 收集和消毒小麦颖果( 1 ) 收集温室生长 10~12 周的小麦穗(见注 25 ) 。( 2 ) 从穗中剥出颖果(见注 26)。( 3 ) 用 70% 乙醇将小麦
操作方法所属实验:基因枪法转化小麦实验
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR,英文名是 PCR-sequence specific oligonucleotide polymorphism, PCR-SSOP,是可以采用一对引物扩增所有 HLA-A2 特异性抗原,用 23 个探针和扩增产物杂交,探针用地高辛系统标记和检测,可以鉴定 A2 的 25 个等位基因,并在中国人群 HLA-AO2 等位基因的检测中进行应用,用 B 淋巴母细胞株作为阴性对照,同时与聚合酶链反应-序列特异性引物 (PCR-SSP) 方法比较,结果发现 PCR
操作方法所属实验:序列特异性寡核苷酸多态性 PCR
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KIR Genotyping by Multiplex PCR-SSP

. We describe here a simple and reliable multiplex PCR-SSP (sequence-specific priming) method for relatively rapid and inexpensive genotyping of 15 KIR genes using standard agarose gel electrophoresis.

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PCR-SSP HLA分型技术

PCR-SSP HLA 分型技术   PCR-SSP(sequence specific primer)分型技术是根据编码各种HLA抗原的等位基因的碱基排列顺序,设计并合成与之互补的寡核苷酸作为PCR引物,样本中HLA等位基因能够用相应的引物(即SSP)进行扩增。通过控制PCR反应条件,SSO仅扩增与其互补结合的HLA等位基因,而不扩增其他的等位基因,PCR扩增产物可用琼脂糖凝胶电泳来鉴定。因此,采用SSP引物对样本DNA进行扩增之后,PCR扩增产物的有无是鉴定HLA

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PCR-SSP结果分析

PCR-SSP 结果分析   采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增的HLA基因阴性;如果该扩增管中未出现内参照引物的扩增产物,则意味

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PCR-SSP结果分析

简介 采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增的HLA基因阴性;如果该扩增管中未出现内参照引物的扩增产物,则意味着PCR扩增出现问题

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PCR-SSP扩增体系的组成和准备

PCR-SSP 扩增体系的组成和准备   (一)SSP引物混合液的准备 预先准备好所有引物的混合液,其中包括除Taq多聚酶和待测基因组DNA之外的所有PCR反应成分,即: (1) 2pmol 5’ 末端和3’末端的引物 (2) 2pmol 内参照引物(β-actin基因引物) (3) 200umol 各种d-NTP(dATP,dCTP,dGTP,dTTP) (4) 1 X PCR缓冲液:10mM Tris-HCl,pH

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PCR-SSP分析实验原理和步骤

相关专题PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3′端第一

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PCR-SSP分析实验原理和步骤

概述 根据决定某等位基因的碱基性质,设计3’端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3‘端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。 PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP

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HLA基因分型方法:PCR-SSP

  PCR - SSP 法   1 )提取 DNA   同前 RFLP 法     2 ) PCR 扩增   操作方法基本同 PCR-RFLP ,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用 SSP 扩增出来的产物具等位基因特异性。     3 )凝胶电泳

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Single Specific Primer-Polymerase Chain Reaction (SSP-PCR) and Genome Walking

only (5 ). This method, the single specific primer-PCR (SSP-PCR), permits amplification of genes for which only a partial sequence information is available, and allows unidirectional genome walking from known into unknown regions of the chromosome.

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Human Platelet Antigen Genotyping by PCR-SSP in Neonatal/Fetal Alloimmune Thrombocytopenia

Neonatal alloimmune thrombocytopenia (NAIT), or fetal maternal alloimmune thrombocytopenia (FMAIT), is a rare disease caused by maternal alloimmunization to inherited paternal human platelet antigens (HPA) expressed on fetal platelets

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PCR-SSP法在HLA-B27检测中的应用

摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符,PCR分型无假阳性及假阴性,血清学方法1例假阳性及1例假阴性,表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健词 PCR-SSP HLA-B27 人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风

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