型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecificoligonucleotide)探针又能探测出等位基因间1~2个核苷酸的差异,故PCR/SSO技术具有灵敏度、特异性强、需样本量少等优点。3. PCR/SSP技术 目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异
Human leukocyte antigen (HLA) typing, utilising the sequence-specific oligonucleotide (SSO) and sequence-specific primer (SSP) technologies, has been in routine use in many tissue typing laboratories worldwide for more than 20 years
. We describe here a simple and reliable multiplex PCR-SSP (sequence-specific priming) method for relatively rapid and inexpensive genotyping of 15 KIR genes using standard agarose gel electrophoresis.
PCR-SSP HLA 分型技术 PCR-SSP(sequence specific primer)分型技术是根据编码各种HLA抗原的等位基因的碱基排列顺序,设计并合成与之互补的寡核苷酸作为PCR引物,样本中HLA等位基因能够用相应的引物(即SSP)进行扩增。通过控制PCR反应条件,SSO仅扩增与其互补结合的HLA等位基因,而不扩增其他的等位基因,PCR扩增产物可用琼脂糖凝胶电泳来鉴定。因此,采用SSP引物对样本DNA进行扩增之后,PCR扩增产物的有无是鉴定HLA
PCR-SSP 结果分析 采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增的HLA基因阴性;如果该扩增管中未出现内参照引物的扩增产物,则意味
简介 采用SSP进行PCR扩增后,相应的PCR产物是否出现,是HLA分型结果的判断的依据,相应SSP扩增产物出现,表示基因组中存在与特异性引物(即SSP)互补结合的DNA序列,即样本为该SSP结合的HLA基因阳性。当某种SSP引物的扩增管中未出现相应的PCR产物时,应注意观察内参照引物是否出现PCR产物。如果该扩增管的内参照引物出现PCR产物,而无相应SSP扩增产物,说明样本为该SSP特异性扩增的HLA基因阴性;如果该扩增管中未出现内参照引物的扩增产物,则意味着PCR扩增出现问题
PCR-SSP 扩增体系的组成和准备 (一)SSP引物混合液的准备 预先准备好所有引物的混合液,其中包括除Taq多聚酶和待测基因组DNA之外的所有PCR反应成分,即: (1) 2pmol 5’ 末端和3’末端的引物 (2) 2pmol 内参照引物(β-actin基因引物) (3) 200umol 各种d-NTP(dATP,dCTP,dGTP,dTTP) (4) 1 X PCR缓冲液:10mM Tris-HCl,pH
相关专题PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3′端第一
概述 根据决定某等位基因的碱基性质,设计3’端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3‘端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。 PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP
PCR - SSP 法 1 )提取 DNA 同前 RFLP 法 2 ) PCR 扩增 操作方法基本同 PCR-RFLP ,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用 SSP 扩增出来的产物具等位基因特异性。 3 )凝胶电泳
only (5 ). This method, the single specific primer-PCR (SSP-PCR), permits amplification of genes for which only a partial sequence information is available, and allows unidirectional genome walking from known into unknown regions of the chromosome.
Neonatal alloimmune thrombocytopenia (NAIT), or fetal maternal alloimmune thrombocytopenia (FMAIT), is a rare disease caused by maternal alloimmunization to inherited paternal human platelet antigens (HPA) expressed on fetal platelets
摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符,PCR分型无假阳性及假阴性,血清学方法1例假阳性及1例假阴性,表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健词 PCR-SSP HLA-B27 人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风