材料与仪器
幼胚盾片
乙醇 漂白消毒剂
诱导培养基
乙醇 漂白消毒剂
诱导培养基
步骤
下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法，幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种，幼穗转化比幼胚盾片转化更有效，如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier，以及其他小麦亚族 Triticeae；硬粒小麦品种 T.turgidum ssp 和小大麦（见注 23 和注 24 )。
1. 收集和消毒小麦颖果
( 1 ) 收集温室生长 10~12 周的小麦穗（见注 25 ) 。
( 2 ) 从穗中剥出颖果（见注 26)。
( 3 ) 用 70% 乙醇将小麦颖果灭菌 5 min，然后用 10% 漂白消毒剂浸泡 15~20 min，中间晃动几次。
( 4 ) 用灭菌水至少洗三次。保持灭菌后颖果的湿度，但是不要浸泡在水中。
2. 分离和预培养幼胚盾片
( 1 ) 在无菌环境中，显微镜下分离幼胚 [ 图 4 .1 ( a ) ] 并且切除胚轴以防止萌发(见注 2 7 )。
( 2 ) 将 25~30 个盾片放置在包含诱导培养基（MS9% 0.5 DAg）、直径 9 cm 的培养皿的中间区域，将胚的切面放置在培养基上，即完整的盾片作为轰击面 [见注 28 , 图 4.1 (b ) ]。
( 3 ) 使用封口膜 Nescofilm (Fisher Scientific UK) 封好平板，轰击前将培养皿放在 22℃ 黑暗条件下预培养 1~2 天（见注 29) 。
1. 收集和消毒小麦颖果
( 1 ) 收集温室生长 10~12 周的小麦穗（见注 25 ) 。
( 2 ) 从穗中剥出颖果（见注 26)。
( 3 ) 用 70% 乙醇将小麦颖果灭菌 5 min，然后用 10% 漂白消毒剂浸泡 15~20 min，中间晃动几次。
( 4 ) 用灭菌水至少洗三次。保持灭菌后颖果的湿度，但是不要浸泡在水中。
2. 分离和预培养幼胚盾片
( 1 ) 在无菌环境中，显微镜下分离幼胚 [ 图 4 .1 ( a ) ] 并且切除胚轴以防止萌发(见注 2 7 )。
( 2 ) 将 25~30 个盾片放置在包含诱导培养基（MS9% 0.5 DAg）、直径 9 cm 的培养皿的中间区域，将胚的切面放置在培养基上，即完整的盾片作为轰击面 [见注 28 , 图 4.1 (b ) ]。
( 3 ) 使用封口膜 Nescofilm (Fisher Scientific UK) 封好平板，轰击前将培养皿放在 22℃ 黑暗条件下预培养 1~2 天（见注 29) 。
来源：丁香实验
