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HLA基因分型方法:PCR-SSP法

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3258

 

PCR SSP

 

1 )提取 DNA

 

同前 RFLP

 

 

2 PCR 扩增

 

操作方法基本同 PCR-RFLP ,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用 SSP 扩增出来的产物具等位基因特异性。

 

 

3 )凝胶电泳

 

PCR 扩增的产物与上样缓冲液混合,加入 2 %琼脂糖凝胶加样孔中,其内加入溴化乙锭,在电压 15V/cm 凝胶条件下电泳 20min ,然后在紫外灯下照相分析结果。

 

 

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