丁香实验-30万科研人都在用的实验宝库

搜索到 317 条结果

综合

专题

实验

方法

问答

文章

RNA 提取与检测

专题56 内容 443 订阅

RNA提取及检测

RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。

实验概况收录 4 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章

全血 RNA 提取实验

全血RNA的提取可用于：（1）研究RNA干扰机制等；（2）用作反转录模板；（3）分子生物学其他研究。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章

RNA提取

获得高质量和完整的 RNA 是很多分子生物学实验中最重要的一步，当前应用最多的是 Trizol/氯仿萃取的方法。

操作方法所属实验：RNA提取及检测

全血RNA提取

红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

操作方法所属实验：全血 RNA 提取实验

问胰腺RNA提取

实验问答3760 围观

问羊的垂体RNA提取

实验问答1349 围观

RNA提取的基本操作步骤

RNA的提取准备试剂：氯仿，异丙醇，75%乙醇，无RNase的水或0.5%SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制) 操作步骤： 1. 匀浆处理： ① 组织将组织在液氮中磨碎，每50-100mg组织加入1ml TRIzol，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%。 ② 单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞

文章资讯1217 阅读

【求助】RNA提取问题，求救高手。

xthuangsui 小弟在做RT-PRC。样本来是SD雄性大鼠附睾精子悬浮液。这样的样本应该如何处理，提取RNA。飘渺的虫普通用trozl法提取rna就可以吧，感觉上没有什么困难啊，主要是量要尽量一致大鹏鸟先离心把精子沉淀下来，1000-4000转都可以，低转速精子活力更高点，然后再提取，按trizol说明书进行。或者可以用提取血液RNA的试剂盒来提取

文章资讯1966 阅读

RNA 的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

本实验主要用于判断RNA提取物的完整性。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章

病毒 RNA 提取实验

病毒RNA提取可以：（1）用于RNA病毒复制机制研究；（2）用于反向遗传学研究；（3）用于分子病毒学其他研究。

实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章

TRIzol RNA提取方法

Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。β-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。细胞裂解后，细胞释放出蛋白质、DNA、RNA等物质，再根据它们在不同的PH值和不同极性溶剂的溶解度不同而使得分开。

操作方法所属实验：TRIzol RNA 提取方法

卵和胚胎细胞总RNA提取

一材料与设备1)5%TritonX-1002) 匀浆缓冲液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,(PH7.5),5 mmol/LEDTA(pH8.0),0.5%SDS,200ug/ml 蛋甶酶 K3) 酚：氯仿 (1:1)4)3mol/L 乙酸钠 (pH5.2)。5) 乙醇6)8mol/L 氯化锂二操作方法1) 将待处理的组织放置下一个干烤过的玻璃匀浆器内，弃去无关的液体，用 0.5% TriwnX-100 洗涤蝇胚，以去除培养基。2) 加 10 倍体积的匀浆缓冲

操作方法所属实验：卵和胚胎细胞总 RNA 提取

问关于RNA提取的相关问题（二）

实验问答1699 围观

问RNA提取中的问题

老鹰归来

75%的乙醇哦亲，室温即可哦亲。配置75%乙醇的水必须经过DEPC处理哦亲。原理：之所以用乙醇是为了让RNA析出哦亲，之所以不用纯乙醇而用75的乙醇是为了溶解RNA提取过程中的胍盐等可溶杂质哦亲，用纯乙醇而不用75的乙醇洗涤RNA会导致最后260/230的比值小于2.0哦亲。260/230低于2.0可以做反转，定量，但是不可以用于测序哦亲。提问者：那也就是说最后一步非要用带水的乙醇对吧，其实真正起洗涤作用的是水，而用浓度较高的乙醇是为了防止RNA的再次溶解，是不是可以这样理解啊？？？答主

实验问答2 回答1698 围观

【求助】提取RNA提取不出来~求助

微笑刺客521 我是想提取RNA，然后在反转录，最后做荧光定量PCR。我用的标本是Hep-2喉癌细胞株，试剂盒是Biomiga_EZgeneTM Biozol RNA kit，每次收集50ml培养瓶里面的细胞，但是总是提取不出来RNA，条带上面也没有，郁闷之极，求解~ athena王难道降解了？ biolinkphilic 尝试用其它提取方法，不妨用传统的提取法或许有意想不到的效果

文章资讯4868 阅读

简单高效的植物总RNA提取利器！

实测植物总RNA提取液套装提取土豆、桑叶中的RNA 一直以来，搞植物研究的同学们对Trizol试剂提取植物RNA诟病不断，在这样的背景和需求下，我们特别研发了植物总RNA提取液套装，套装中除了植物总RNA提取液外，还包括了Buffer EX(氯仿替代品)，RNA沉淀液（异丙醇替代品）以及β-巯基乙醇。真可谓一个套装在手，提取植物RNA无烦恼！现在我们特别选择了土豆块茎（Trizol试剂提取失败）和桑叶（Trizol试剂提取效率极低）两个典型样本实测植物总RNA提取液套装的效果。实验目的

文章资讯1692 阅读

卵和胚胎细胞总 RNA 提取

本方法是分离蛙、海胆、被囊动物、蠕虫和蝇的卵母细胞、受精卵及其胎细胞 RNA 的简便有效的方法。

实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章

植物 RNA 提取实验

植物RNA提取可应用于：（1）进行植物分子生物学方面的研究；（2）进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。

实验概况收录 2 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章

组织块中RNA提取及检测

Pa, 30 min)。（3）乙酸钠溶液（2 mol／L，pH4.0）乙酸钠，54.4 g；DEPC处理水，20 ml；用冰醋酸调pH至4.0，加DEPC处理水至200 ml，高压灭菌（1.034 x 105 Pa，20 min）。（4）氯仿-异戊醇混合液（49：1）氯仿，49 ml；异戊醇，1 ml；混合上述液体，4 ℃保存。（5）70％乙醇的配制无水乙醇，70 ml；DEPC处理水定容至100 ml；混合后置-20 ℃保存。（二）RNA提取（1）取已从活体上取下的组织约1.5 g置冰上

操作方法所属实验：RNA提取及检测