植物 RNA 提取实验

实验分类：

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

植物RNA提取可应用于：（1）进行植物分子生物学方面的研究；（2）进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。

来源：丁香实验

操作方法

直接研磨法

一、新鲜植物组织称重后取100 mg迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100 mg放入研钵），加入10体积（1 ml）RLT(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积（100 ul） PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RLT立刻充分接触以抑制RNA酶活性。二、将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15秒，13 000 rpm离心5-10分

液氮研磨法

一、取500 ul裂解液RLT(已经加入β-巯基乙醇)，转入1.5 ml离心管中，加入50 ul PLANTaid混匀备用。二、液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50 mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管，立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物，但是淀粉含量高的植物不能温育，因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。三、用带钝针头的一次性 1 ml