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简介
RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。
原理
RNA提取的基本原理是利用异硫氰酸(guanidineisothiocyanale)是一类有效解偶剂,当细胞被它溶解后,蛋白质二级结构消失,细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸解离。在4 mol/L异硫氰酸胍和β-巯基乙醇存在下,RNA酶失活,可提取完整的总RNA。
来源:丁香实验团队
操作方法
RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。
培养细胞中RNA提取及检测RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。
RNA提取获得高质量和完整的 RNA 是很多分子生物学实验中最重要的一步,当前应用最多的是 Trizol/氯仿萃取的方法。
RNA 提取获得高质量和完整的 RNA 是很多分子生物学实验中最重要的一步,当前应用最多的是 Trizol/氯仿萃取的方法。
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