RNA提取中的问题

75%的乙醇哦亲，室温即可哦亲。配置75%乙醇的水必须经过DEPC处理哦亲。 原理：之所以用乙醇是为了让RNA析出哦亲，之所以不用纯乙醇而用75的乙醇是为了溶解RNA提取过程中的胍盐等可溶杂质哦亲，用纯乙醇而不用75的乙醇洗涤RNA会导致最后260/230的比值小于2.0哦亲。260/230低于2.0可以做反转，定量，但是不可以用于测序哦亲。 提问者：那也就是说最后一步非要用带水的乙醇对吧，其实真正起洗涤作用的是水，而用浓度较高的乙醇是为了防止RNA的再次溶解，是不是可以这样理解啊？？？ 答主：是的。其实提取RNA每一步都是很有讲究的，比如说加入氯仿抽提那一步一定要是用手上下剧烈摇动而不是用旋窝振荡器震荡，因为要达到上下分层的目的必须要上下震动，圆周震动是不会达到很好的分层的效果。

我觉得RNA提取 只有三个问题 1 标本量留足，2 加入氯仿离心后 吸取上层RNA相的时候要小心 尽量留点不要全部吸取 3 就是加入depc处理的75%乙醇洗涤之后 要多吹吹 让它蒸发掉 这样就会有很好的浓度和纯度的RNA出来 其他的什么防止酶污染啊 都是次要的 提的时候戴手套少说话就好