【求助】提取RNA提取不出来~求助
丁香园论坛
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我是想提取RNA，然后在反转录，最后做荧光定量PCR。我用的标本是Hep-2喉癌细胞株，试剂盒是Biomiga_EZgeneTM Biozol RNA kit，每次收集50ml培养瓶里面的细胞，但是总是提取不出来RNA，条带上面也没有，郁闷之极，求解~
难道降解了？
尝试用其它提取方法，不妨用传统的提取法或许有意想不到的效果。
我感觉是不是我收集细胞的时候有问题啊~或者我的手法不正确？
感觉还是Trizol 的方法经典
我们用的天根的试剂盒提的效果还不错呢！你可能裂解细胞的时候没有裂解好或者提取的过程中降解！
你用trizol试试看！
好的~谢谢大家~
降解不会那么彻底的,估计是细胞数量可能太少....
50ml培养瓶里面的细胞不够吗？？？
1. 保证细胞数量要足够，提取的时候细胞应该铺70%以上.
2.细胞裂解很关键，详细按照试剂盒的要求操作，保证有足够的裂解时间。
3.试剂使用要规范，要严格使用进口无RNA酶的枪头进行操作。
4.特此强调洗脱RNA的水一定要干净无RNA酶。
如果还不能提取出来，可以更换提取方法，比如TRZOL法或者别的公司的试剂盒。
2.细胞裂解很关键，详细按照试剂盒的要求操作，保证有足够的裂解时间。
3.试剂使用要规范，要严格使用进口无RNA酶的枪头进行操作。
4.特此强调洗脱RNA的水一定要干净无RNA酶。
如果还不能提取出来，可以更换提取方法，比如TRZOL法或者别的公司的试剂盒。
可能是细胞裂解不完全或者是提取过程中降解 再者环境因素也是很重要的
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