【求助】关于单负链病毒RNA提取及逆转录的问题

我最近正在做单负链RNA病毒（狂犬病毒）的rna提取，逆转录及目的基因的扩增，可是结果是 目的基因没有出现，引物是在比对后在保守处设计的，但是产物除了引物条带和一非特异条带（30个循环，不是很亮）外，再无其它条带，尝试提高退火温度 但是结果仍不好，合成cDNA的时候，使用的是以ATG（应该是上游引物吧）开头的引物。我不知道哪里出错了，希望能得到大家的建议。
目的条带大概在1500bp附近，P出来的条带在500~750之间，最下面的为引物带，

提取的RNA跑过胶吗？图放上来看看。
建议：1、使用随机引物做逆转录，这样的话更好扩一些。
2、PCR的时候试用LA-taq看看。因为1500BP其实也不短了。
3、摸好PCR的反应条件，实在不行，分段扩增。

谢谢！提取过三次RNA但是只有前两次跑过胶，因为知道没有RNA并不意味着没有RNA产物。下面是我前两次跑的RNA。





对于PCR条件的摸索，我之前用55°退火，会出现之前的发的条带，用58°退火也如此，提高到60°时 就没有条带了，如下图：
第一孔为不佳模板对照，第二孔为用cDNA进行PCR

而我不加模板PCR时，有时会出现跟模板一样的条带，如下：

第二个孔为不加模板PCR结果。那么我现在怀疑，难道我一直以来P出来的很淡的特异性条带根本就是引物之间发生结合的结果么？因为之前别人设计过一对引物也会出现这样的情况，所以我很郁闷。

您好，请问我抽的病毒RNA跑胶没有条带，您抽的RNA跑胶是有条带的是吗？