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传代培养喉癌细胞有哪些注意事项?染菌好多次了,求助

相关实验:细胞的传代培养实验

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合作专家 | 陈慕华博士

肿瘤学 北京大学

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审核专家 | 聂壹峰博士

纳米生物医学 中国科学院大学

材料与仪器

胰蛋白酶、离心机

步骤

喉癌细胞系一般均属贴壁细胞。传代的时候,要注意以下事项:

(1)细胞消化要适度,如何判断适度?当去除胰酶,轻轻拍打培养皿,可以看到细胞呈泥沙状脱离培养皿底;

(2)终止胰酶后,需要离心去上清,去除残余胰酶对细胞的影响;

(3)传代时候,需要先在培养皿中加好适量培养基。将细胞沉淀用 1 ml 培养基吹打成单个细胞,动作要轻柔。一般 1:2-1:3 传代,不可过稀;

(4)预防细胞污染的关键:增强无菌观念,全程无菌操作,随时喷 75% 酒精进行手部消毒。手、移液器等物体切忌从打开的培养皿上方过。若移液器倒吸,立刻扔掉tip头里的细胞,不要存侥幸心理,换一个移液器再操作。污染的移液器需要清理后紫外灭菌再使用。

来源:丁香实验

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