简介
简单拍打传代培养是适用于悬浮细胞的传代培养方法。
原理
简单拍打传代培养的基本原理是通过直接吹打或离心后，即可加以传代。
材料与仪器
器材：
① 原代培养的外周血淋巴细胞
② 25 mL 培养瓶
③ 吸管
④ 胶帽
⑤ 离心管
⑥ 酒精棉球
⑦ 酒精灯
⑧ 离心机
⑨ 倒置显微镜
⑩ 超净工作台
⑪ CO2 培养箱。
试剂:
① D-Hanks 液
② DMEM 培养基（含 10％ 小牛血清）
步骤
简单拍打传代培养基本过程可分为以下几步：
A. 将原代培养的外周血淋巴细胞连同培养液一并转移到离心管中。
B. 800～1000 r/min 离心 5 min，去除上清液。
C. 加新的培养液到离心管中，吸管吹打、制悬。根据细胞的数量多少，将细胞悬液按 1:2 或 13 的比例分别接种于新的培养瓶中。
注意事项
1. 在对细胞进行吹打时，不能用力过猛，尽量不出现气泡，以免损伤细胞。
2. 传代培养的过程通常较长，细胞被污染的可能增加，因此，必须严格进行无菌操作。
来源：丁香实验
