常规组织传代培养
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1. 吸除培养瓶内旧培养液。
2. 向瓶内加入胰蛋白酶和 EDTA 混合液少许,以能覆满瓶底为限。
3. 置温箱中 2~5 分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。
4. 吸除消化液,向瓶内注入 Hanks 液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加 Hanks 液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用 Hanks 液冲洗,直接加入培养液。
5. 用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。
6. 计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。