材料与仪器
NA片段
纯化试剂盒 异丙醇
离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置
纯化试剂盒 异丙醇
离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置
步骤
1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。
2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。
3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。
4. 振荡后离心(10 000 g,10 min),取上清液,并再用200 ul 洗脱缓冲液II洗涤旧管,离心再取上清液。
5. 合并两次上清液,乙醇+醋酸钠沉淀同前。
2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。
3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。
4. 振荡后离心(10 000 g,10 min),取上清液,并再用200 ul 洗脱缓冲液II洗涤旧管,离心再取上清液。
5. 合并两次上清液,乙醇+醋酸钠沉淀同前。
来源:丁香实验