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综合
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文章
问
Q-
PCR
和
PCR
引物设计
的区别在哪？
啥也不懂来问we问
qpcr引物特异性要求更高，且qpcr扩增长度更短。
1 回答
292 围观
问
PCR
引物设计
及内参
Topmicro
取动物外周血进行实时荧光定量
PCR
目标基因和内参应该都用动物源的，如果检测肿瘤组织的话应该都用人源的。
3 回答
1273 围观
问
普通
pcr
引物设计
和荧光定量
pcr
引物设计
的区别
dxy_j7jezao0
qPCR为保证扩增效率，产物片段较小，70-250bp,TM值一般60左右其他差别较小
4 回答
3086 围观
问
引物设计
loveliufudan
设计pre-miRNA和pri-miRNA的引物需要注意以下几点：确定目标序列：首先需要确定目标miRNA的pre-miRNA或pri-miRNA的序列，可以通过基因组浏览器等工具获取。引物长度：通常选择长度为18-24bp的引物。Tm值：引物的Tm值需要在50-65摄氏度之间。特异性：引物需要具有较好的特异性，避免引物与非目标序列的杂交。
引物设计
软件：可以使用一些在线或离线的
引物设计
软件，例如Primer3、OligoCalc等，这些软件可以根据以上要求自动设计引物。
引物设计
策略：根据不同
2 回答
1074 围观
问
对于
pcr
引物设计
和荧光定量
pcr
引物设计
的根本区别在哪里？
秋秋欣欣
同一个基因的引物是没有区别的，只是没有扩增基因。
3 回答
908 围观
问
利用加尾法 real-time
PCR
方法检测 miRNA，
PCR
上游
引物设计
有什么诀窍和原则吗？
修玛杨
miRNA
引物设计
很麻烦，如果不差钱的话找靠谱的公司设计吧。就是那种能保证
引物设计
没有问题的公司，就是价格要比自己设计的高一些，但是省心。
2 回答
3905 围观
问
引物设计
问题
土井挞克树
可以选择98.64%那一款进行实验
1 回答
407 围观
问
CasRx系统
引物设计
土井挞克树
1.sgRNA设计1.1设计原则1） II型CRISPR系统（SpCas 9）的sgRNA 靶点一般为20nt2）sgRNA序列的碱基组成：基因特异的sgRNA 模板序列位于PAM 序列前，PAM序列的特征为NGG (N可以为任意核苷酸)3）sgRNA的序列应避免以4个以上的T结尾，GC%含量为30%-70%4）sgRNA的序列与On-target和Off-target的匹配数都应尽可能的高。5）如果构建U6启动子或H1启动子驱动sgRNA的表达载体，需要考虑sgRNA的5'碱基为G或GG
1 回答
484 围观
问
STR
引物设计
如何开始呢？
天一湖医者
引物以18～30bp为宜；引物中C+G含量宜在50%左右；引物内部和引物之间不应含有互补序列；引物的碱基顺序与非扩增区域的同源性应小于70%；引物的3’末端与模板DNA一定要配对，但末端没有严格的限制，故
引物设计
时可在5’末端加上限制性内切酶位点和/或启动密码ATG等；引物合成后必须纯化以去除合成产物中的不完整序列、脱嘌呤产物、碱基修饰链等“杂质”；引物的终浓度一般为0.2～0.5μmol/L，过低会影响反应产量，过高会增加引物二聚或错配的几率。
2 回答
1504 围观
问
在做
PCR
的
引物设计
时添加酶切位点应该考虑哪些问题？
我是金博士
1、移码：这是最重要的，一定要放到具体的质粒上去看，看看你加的酶切位点，连上你的目的基因，是不是会引起移码。2、酶切位点是否好切：尽量选实验室常用的，前提是你的基因片段不能有酶切位点序列，要不然就会连基因也切碎了。3、保护碱基：针对不同的酶切位点，选择不同的碱基。一般是3个，至于具体选CG还是AT就要看你的引物Tm以及碱基含量。
1 回答
1785 围观
问
甲基化
引物设计
土井挞克树
DNA浓度太低会影响引物的结合，建议增加含量再设计引物
2 回答
474 围观
问
PCR
实验
引物设计
有什么要求？TM值一般多少最合适？
汤姆卜丽波
3’端的互补、二聚体或发夹结构也可能导致
PCR
反应失败，5、碱基要随机分布，且引物自身和引物之间 不能有连续4个碱基的互补。6、尽量在基因的编码区 （CDS序列）上设计引物，限制基因组DNA扩增。
5 回答
22104 围观
问
引物设计
天一湖医者
这个原因应该是发生了非特异性结合。
3 回答
563 围观
问
有大佬听说过接头引物的设计吗，和普通
PCR
引物设计
有什么不同吗
灵枢天问
在设计上和普通引物的原则是一致的，但是它的序列取决于你的目的基因序列和测序配套的接头要求
3 回答
541 围观
问
Oligo和primer—BLAST
引物设计
的缺点是什么？
dxy_aget1u8q
primer的设计引物操作简单，但是不灵活，最终引物好不好还是要看
pcr
结果
1 回答
542 围观
问
shRNA的
引物设计
及特异性问题
bamboopiggy
最好不要用，否则如果出现脱靶效应，你没法解释。
1 回答
405 围观
问
引物设计
求助！！！
xijun_song
什么基因？可以帮设计引物，欢迎交流。
4 回答
474 围观
问
QP
引物设计
bamboopiggy
一般问题不大，只要遵循了qpcr
引物设计
的原则，并且出来的melt curve是单峰，就可以用
3 回答
487 围观
问
请问同源重组
引物设计
怎么考虑移码呢？
Eason老歌迷
如果你的目的是让目的基因不表达,抗性基因自带启动子不需要考虑移码突变。你的抗性基因表达是从启动子开始的,与之前乱七八糟的无关。
2 回答
1819 围观
问
miRNA及mRNA
引物设计
bamboopiggy
可以先试试，如果不起作用再改。一般设计miRNA和mRNA的引物只区别物种
4 回答
781 围观
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