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在做PCR的引物设计时添加酶切位点应该考虑哪些问题?

相关实验:聚合酶链式反应(PCR)

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7023石头

在做PCR的引物设计时添加酶切位点应该考虑哪些问题?
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1 个回答

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我是金博士

有帮助
1、移码:这是最重要的,一定要放到具体的质粒上去看,看看你加的酶切位点,连上你的目的基因,是不是会引起移码。2、酶切位点是否好切:尽量选实验室常用的,前提是你的基因片段不能有酶切位点序列,要不然就会连基因也切碎了。3、保护碱基:针对不同的酶切位点,选择不同的碱基。一般是3个,至于具体选CG还是AT就要看你的引物Tm以及碱基含量。
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