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    在做PCR的引物设计时添加酶切位点应该考虑哪些问题？

    相关实验：聚合酶链式反应（PCR）

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    7023石头

    在做PCR的引物设计时添加酶切位点应该考虑哪些问题？
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    1 个回答

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    我是金博士

    有帮助
    1、移码：这是最重要的，一定要放到具体的质粒上去看，看看你加的酶切位点，连上你的目的基因，是不是会引起移码。2、酶切位点是否好切：尽量选实验室常用的，前提是你的基因片段不能有酶切位点序列，要不然就会连基因也切碎了。3、保护碱基：针对不同的酶切位点，选择不同的碱基。一般是3个，至于具体选CG还是AT就要看你的引物Tm以及碱基含量。

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