PCR有产物但是电泳无结果是为什么？

且行且乐

2013-09-21

PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul，但电泳无目的片段的条带，内参也没条带。电泳中maker能跑出条带，用引物也点了样，引物的条带稍模糊但还是有，请问是哪里出了问题？

15 个回答

dxy_oasjede4

2020-09-23

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dNTP和引物都是有吸光度的，所以就算PCR没扩增也会测出浓度，你该用qubit测双链DNA浓度看看或者溶解曲线试试

dxy_oasjede4

2020-07-29

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因为PCR体系中的dNTP同样可以吸收紫外光，你所测的浓度有可能都是来自dNTP

dxy_tug83oy8

2019-03-11

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可以尝试"降落PCR"

dxy_iwqdsrj

2018-11-01

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1，marker和引物有条带，说明在跑胶的环节应该没什么问题2.内参和目的条带均没有，说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题，就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题

yanghai-suda

2018-03-18

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和其他人意见一样，就是你PCR反应出问题了，PCR没有扩增出目的条带，很简单，重新调整PCR参数，重新PCR

AQ_Bio_Z

2016-08-18

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用紫外测浓度不能评判你PCR的成败。你用自来水去测一下，说不定也有一定数值。应该是PCR的过程有问题，导致没有扩增出来。

厦门易百泰

2016-03-13

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用紫外分光测定DNA含量，其实是测溶液的浊度，并不确定是DNA。做这个测定需要做对照的。

九夏宿诺

2016-01-12

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都木有看到浓度单位应该是ug/ml吗？

不高兴233

2015-06-08

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我们老师说还是以电泳结果为准，测浓度的那个即使有数据也不见得有产物

童话天

2015-05-19

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对照组实验样品出现了吗？

李武500

2015-01-27

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PCR产物一般没有那么高浓度的，一般是几个微克每微升就很不错了，你肯定是没测对，还有你Maker能跑出，说明你根本就没有P出来，在pcr上找原因吧

curiehxn

2013-09-25

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加EB了没有

棉花糖1号

2013-09-24

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PCR的问题，内参都没有的话，应该就是PCR出了问题，体系出了问题，否则内参应该是要有的

大窟窿眼

2013-09-24

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退火温度的设置有着很大的关联，可以从这个方面下手。前期我也遇到这种现象。

alaling

2013-09-24

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1，marker和引物有条带，说明在跑胶的环节应该没什么问题 2.内参和目的条带均没有，说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题，就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题 3.你说电泳无目的片段的条带，是指有其它非特异条带还是根本就没有条带？如果可以，放上图是最好的，大家都可以一目了然，比这里做排除法强的多