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PCR有产物但是电泳无结果是为什么?

相关实验:聚合酶链式反应(PCR)

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且行且乐

PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul,但电泳无目的片段的条带,内参也没条带。电泳中maker能跑出条带,用引物也点了样,引物的条带稍模糊但还是有,请问是哪里出了问题?
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10 个回答

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dxy_tug83oy8

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可以尝试"降落PCR"
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dxy_iwqdsrj

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1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题
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yanghai-suda

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和其他人意见一样,就是你PCR反应出问题了,PCR没有扩增出目的条带,很简单,重新调整PCR参数,重新PCR
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AQ_Bio_Z

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用紫外测浓度不能评判你PCR的成败。你用自来水去测一下,说不定也有一定数值。应该是PCR的过程有问题,导致没有扩增出来。
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厦门易百泰

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用紫外分光测定DNA含量,其实是测溶液的浊度,并不确定是DNA。做这个测定需要做对照的。
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不高兴233

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我们老师说还是以电泳结果为准,测浓度的那个即使有数据也不见得有产物
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李武500

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PCR产物一般没有那么高浓度的,一般是几个微克每微升就很不错了,你肯定是没测对,还有你Maker能跑出,说明你根本就没有P出来,在pcr上找原因吧
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棉花糖1号

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PCR的问题,内参都没有的话,应该就是PCR出了问题,体系出了问题,否则内参应该是要有的
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大窟窿眼

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退火温度的设置有着很大的关联,可以从这个方面下手。前期我也遇到这种现象。
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alaling

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1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题 2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题 3.你说电泳无目的片段的条带,是指有其它非特异条带还是根本就没有条带?如果可以,放上图是最好的,大家都可以一目了然,比这里做排除法强的多
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