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转录 cDNA 探针
从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNa 探针(cDNa probe)。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
探针合成实验
探针是一小段单链DNA或者RNA片段(大约是20到500 bp),用于检测与其互补的核酸序列。双链DNA加热变性成为单链,随后用放射性同位素(通常用磷-32)、萤光染料或者酶(如辣根过氧化物酶)标记成为探针
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
TaqMan 荧光探针
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收。
操作方法所属实验:Real-time qPCR 实验
地高辛标记探针的信号
1.  用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6)。 2.  加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜,置37℃温育30 min。3.  移去Parafilm 膜,分别在4×SSC、0.1% Triton X-100/4×SSC、4×SSC中洗片,每次15 min。 4.  吸去残余4×SSC,加50 μl 地高辛信号放大溶液于玻片上,盖以22 mm2 的Parafilm 膜,放加湿盒中
操作方法所属实验:杂交信号的放大实验
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cRNA探针

cRNA 探针       cRNA探针是以eDNA为模板在体外转录而成的探针,可方便地通过已克隆于特定质粒载体的,DNA产生。这些质粒通常在紧邻多克隆位点的位置含有一个噬菌体启动子。应用相关的RNA聚合酶和4种核糖核苷(rNTPs)(其中至少一种带有标记物)进行体外转录反应,依赖DNA的RNA聚合酶以克隆的cDNA为模板,以含有标记物的三磷酸核糖核苷为原料,从启动子下游开始在体外转录产生RNA。通过改变外源cDNA在质粒中的插入方向或选用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的转录

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体视学几何探针

体视学几何探针       在明确二维参数与三维参数之间的关系之后,欲得到三维数据首先要准确有效地获取二维参数。在体视学中这些问题非常容易解决,只要利用适合的几何探针(geometric probes)和恰当的计数方法便可以得到。体视学的测试探针包括零维的测试点(test point)、一维的测试线(testline)、二维的测试框(testframe)、三维的体视框(disector)。 几何探针 a.为测试点;b.为测试线;c.为测试框     利用几何探针进行二维参数

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DNA 探针的标记实验
核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
DNA 片段探针的应用实验
所谓探针,一般是指用来检测某一特定核苷酸序列或基因序列的DNA片段或RNA片段。但要使探针DNA片段能实际应用,必须使DNA或RNA分子带上可识别的信号标志,以便跟踪观察探针与其同源的核苷酸序列发生杂交反应的位置,被探测DNA或RNA片段上的大小、杂交信号的强弱等。目前应用最多的是核素标记方法或非核素标记方法。
实验概况收录 2 操作方法 · 3 相关文章
探针标记法
1.  用于标记的DNA模板尽可能纯化,以提高标记效率2.  模板DNA>100 bp。3.  经DIG标记的探针不能用酚/氯仿抽提纯化4.  根据说明书确定标记效率(标记探针及试剂盒阳性对照DIG标记DNA梯度稀释,尼龙膜点样,样本变性,封闭,杂交,现色定量)。5.  本法亦可用于单链DNA或RNA探针的标记,当标记RNA探针时,需采用逆转录酶,收获产物为标记的单链cDNA。6.  可根据下表标记产物。 
操作方法所属实验:DNA 探针的标记实验
DNA 酶 I 足迹探针的制备实验
器(Savant Instruments,Inc.)丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸铵TEMED(N,N,N',N'-四甲基乙二胺)试剂TE牛肠碱性磷酸酶缓冲液(10x)T4 多核苷酸激酶缓冲液(10x)TBE 加样缓冲液(5X)TBE(10x)(配方,见“试剂的配制” pp.131~138.)操作程序质粒 DNA用于制备 DNA 酶 I 足迹探针的质粒 DNA 必须是高质量的(CsCl 纯化的),其 RNA 杂质的含量必须很低。RNA 杂质会抑制激酶的反应。我们一般采用连续两步 CsCl 梯度法纯化 DNA。第一
操作方法所属实验:DNA 酶 I 足迹探针的制备实验
实验问答3655 围观
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如何快速得到芯片探针与gene的对应关系,并将探针转换成基因?

现有的基因芯片种类很多,但重要而且常用的芯片并不多,一般分析芯片数据都需要把探针的 ID 切换成基因的 ID。一般有三种方法可以得到芯片探针与 gene 的对应关系:① 金标准是去基因芯片的厂商的官网直接下载② 从 NCBI 里面下载文件来解析③ 直接用 bioconductor 包。其中前两种方法都比较麻烦,所以接下来要讲的是:如何用 R 的 bioconductor 包来批量得到芯片探针与 gene 的对应关系。一、说明1. 一般重要的芯片在 R 的 bioconductor 里面都是有包

文章资讯16315 阅读
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随机引物法探针标记

随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火),以提供3, 羟基端,在无5, →3, 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下,在引物的3, 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时,即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列,引物与模板的结合以一种随机的方式发生,标记均匀跨越DNA全长。当以RNA

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DNA 酶 I 足迹探针的制备实验
DNA 酶 I 足迹分析是检测和鉴定转录因子对 DNA 的序列特异性结合能力的一种有效方法(Galas 和 Schmitz,197S)。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
用检测和驱动 DNA 探针进行差异杂交实验
下面 4 个探针用于差异筛选杂交。1. 检测者特异性消减探针(正向消减探针)。2. 驱动者特异性消减探针(反向消减探针)。3. 从检测者 mRNA(或检測者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。4. 从驱动者 mRNA(或驱动者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
地高辛标记探针的信号放大
1) 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片。2) 加50μL 10 /ng/ml的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2大小的Para- film 膜,置 37℃温育 30 min。3) 移去Parafilm 膜,分别在 4×SSC、0.1 % Triton×-100/4 ×SSC、4×SSC 中洗片, 每次15 min。4) 吸去残余4×SSC,加50μL地高辛信号放大溶液于玻片上,盖以22 mm2的Para- film膜,放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔,置37℃温育30 min
操作方法所属实验:用非同位素探针进行原位杂交和检测实验
用检测和驱动 DNA 探针进行差异杂交实验
下),以及它们的互补寡核苷酸]经过剪切的鲑鱼精 DNA(10 mg/ml)3. 探针纯化的检测者和驱动者探针,随机引物法标记(每 100ng 消减 DNA 至少 107cpm)(可选,见第 9 步)4. 专用设备沸水浴杂交炉,预热至 72°C5. 附加试剂ExpressHyb Hybridization Kit(Clontech)放射自显影所需的试剂与设备二、方法1. 使用商业试剂盒,用随机引物法标记驱动和检测 DNA 探针。这里所给的杂交条件是根据 Cbntech 的 ExpressHyb 溶液来优化
操作方法所属实验:用检测和驱动 DNA 探针进行差异杂交实验
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