材料与仪器
杂交信号
地高辛 SSC BSA 荧光素
加湿盒 水浴锅 培养箱
地高辛 SSC BSA 荧光素
加湿盒 水浴锅 培养箱
步骤
1. 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6)。
2. 加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜,置37℃温育30 min。
3. 移去Parafilm 膜,分别在4×SSC、0.1% Triton X-100/4×SSC、4×SSC中洗片,每次15 min。
4. 吸去残余4×SSC,加50 μl 地高辛信号放大溶液于玻片上,盖以22 mm2 的Parafilm 膜,放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔,置37℃温育30 min。
5. 重复步骤3冼片。
5. 重复步骤3冼片。
6. 复染,加盖玻片并镜下观察结果(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤9~12)。
来源:丁香实验