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简介
核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。
来源:丁香实验
操作方法
1. 灭菌去离子水稀释1 ug DNA至总体积16 ul。 2. DNA热变性:DNA样品于PCR仪中100℃变性10 min,后迅速置于碎冰中3 min 以上。 3. 加4 ul DIG-Random Labeling Mix,混匀后离心2000 rpm×5 min(4℃)。 4. PCR仪37℃反应过夜。 5. 加2 ul EDTA终止反应,标记结束。标记物
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