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基础培养基成分:
1. DMEM/F12培养基:将Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)和Ham’s F12培养基以1:1的比例混合。
添加剂成分:
1. 胰岛素(Insulin):5-10 μg/mL
2. 转铁蛋白(Transferrin):5-10 μg/mL
3. 肾上腺素(Epinephrine):1-10 μM
4. 氯化钠(NaCl):120 mM
5. 葡萄糖(Glucose):5-25 mM
6. 苯甲磺酰氨基甲基叔丁基酯(SB202190)或其他适当的生长因子或细胞因子。
毛利小五郎的徒弟
培养基的配方如下表所示,供你参考
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培养基配制:将200μL Mouse Intestinal Organoid Supplement B (50x),40μL Mouse Intestinal Organoid Supplement C (250x) 加至 9.76mL Mouse Intestinal Organoid Basal Medium 中,充分混合,配制成 10mL 小鼠小肠类器官完全培养基。室温平衡,可在 2-8°C 储存,建议在两周内使用。
准备足量添加1%双抗的PBS
准备足量添加0.1%BSA的PBS
配制5mM EDTA溶液:4mL预冷DPBS溶液加40μL 0.5M EDTA溶液pH8.0,置冰上备用。
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