小鼠原代肝细胞提取求助

考虑以下几点原因:1.培养液配制的浓度不够，导致培养液失效。2.接种浓度不够。3。胰蛋白酶的活性弱。

把流速降低一下，流速过高会打碎细胞

可能有几个原因导致肝细胞死亡：

1. 消化液浓度过高：四型胶原酶的浓度可能过高，导致消化液对肝细胞产生毒性作用。你可以尝试降低四型胶原酶的浓度，以减少细胞损伤。

2. 灌流速度过快：灌流速度过快可能导致肝细胞无法适应环境的变化，造成细胞应激和死亡。你可以尝试降低灌流速度，给予细胞更多适应和恢复的时间。

3. 灌流液pH值不适宜：灌流液的pH值可能对细胞生存起着重要作用。确保灌流液的pH值在适宜的范围内（一般为7.2-7.4）可能有助于减少细胞损伤。

由于刚刚经过胶原酶消化的肝细胞极其脆弱，过于用力会导致肝细胞破碎，导敢提取失败。